[發明專利]三角褐指藻的雙層平板固體培養方法

無效

• 申請號: 201110250683.2
• 申請日: 2011-08-29
• 公開（公告）號: CN102296031A
• 公開（公告）日: 2011-12-28
• 發明（設計）人: 鄭天凌;黃麗萍;鄭小偉;張幫周
• 申請（專利權）人: 廈門大學
• 主分類號: C12N1/12
• 分類號: C12N1/12;C12R1/89
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所 35200
• 代理人: 馬應森;戴深峻

技術領域

本發明涉及三角褐指藻(Phaeodactylum?tricornutum，PT)的培養，尤其是涉及一種三角褐指藻的雙層平板固體培養方法，以獲得三角褐指藻的固體藻平板。

背景技術

溶藻微生物，諸如溶藻的細菌、放線菌、病毒、真菌和原生動物的不斷發現，為赤潮的微生物防治開拓了廣闊的前景，而溶藻微生物的分離是赤潮微生物防治的基礎。

溶藻微生物的分離和篩選通常有兩種途徑：一種是通過液體感染的方式，另一種是通過固體感染的方式。液體感染的方法是通過監測藻的生長是否受抑制來判斷體系中是否存在溶藻微生物，包括用普通光學顯微鏡觀察藻細胞是否發生裂解(1.Takao，Y.，K.Nagasaki，K.Mise，T.Okuno，D.Honda，Isolation?and?characterization?of?a?novel?single-stranded?RNA?virus?infectious?to?a?marine?fungoid?protist，Schizochytrium?sp(Thraustochytriaceae，labyrinthulea).Applied?and?Environmental?Microbiology，2005.71(8)：4516-4522.)，或通過肉眼觀察藻液顏色是否發生變化(2.Tomaru，Y.，Y.?Shirai，H.Suzuki，T.Nagumo，K.Nagasaki，Isolation?and?characterization?of?a?new?single-stranded?DNA?virus?infecting?the?cosmopolitan?marine?diatom?Chaetoceros?dehilis.Aquatic?Microbial?Ecology，2008.50(2)：103-112；3.Imamura，N.，I.Motoike，N.Shimada，M.Nishikori，H.Morisaki，H.Fukami，An?efficient?screening?approach?for?anti-Microcystis?compounds?based?on?knowledge?of?aquatic?microbial?ecosystem.Journal?of?Antibiotics，2001.54(7)：582-587.)，或檢測藻熒光值是否下降(4.Bettarel，Y.，J.Kan，K.Wang，K.E.?Williamson，S.Cooney，S.Ribblett，F.Chen，K.E.Wommack，D.W.Coats，Isolation?and?preliminary?characterisation?of?a?small?nuclear?inclusion?virus?infecting?the?diatom?Chaetoceros?cf.gracilis.Aquatic?Microbial?Ecology，2005.40(2)：103-114；5.Su，J.Q.，X.R.Yang，T.L.Zheng，Y.Tian，N.Z.Jiao，L.Z.Cai，H.S.Hong，Isolation?and?characterization?of?a?marine?algicidal?bacterium?against?the?toxic?dinoflagellate?Alexandrium?tamarense.Harmful?Algae，2007.6(6)：799-810.)，來判斷是否存在溶藻微生物，該方法適用于各種大小的藻類溶藻微生物的分離和篩選。但該方法存在很多缺點：例如，有時需要每天通過顯微鏡觀察對照組和處理組的藻細胞是否裂解，工作量大，且有些藻類的細胞較小在光學顯微鏡下不容易判斷是否裂解；有時一些非生物因素也會導致藻細胞裂解或生長受抑制，易產生假陽性結果；有時雖然體系中存在溶藻微生物但并不能明顯的抑制藻的生長，易產生假陰性結果。固體感染的方法是通過肉眼觀察藻平板上是否出現空斑來判斷體系中是否存在溶藻微生物(6.Bellec，L.，N.Grimsley，Y.Desdevises，Isolation?of?Prasinoviruses?of?the?Green?Unicellular?Algae?Ostreococcus?spp.on?a?Worldwide?Geographical?Scale.Applied?and?Environmental?Microbiology，2010.76(1)：96-101；7.Kim，J.D.，J.Y.Kim，J.K.Park，C.G.Lee，Selective?Control?of?the?Prorocentrum?minimum?Harmful?Algal?Blooms?by?a?Novel?Algal-Lytic?Bacterium?Pseudoalteromonas?haloplanktis?AFMB-008041.Marine?Biotechnology，2009.11(4)：463-472.)，僅適合能在固體培養基上生長的藻類的溶藻微生物的分離和篩選，但其相對液體感染的方法更簡單、直觀。