[發明專利]轉基因棉花多重PCR-DHPLC檢測引物及檢測方法

有效

• 申請號: 201110248343.6
• 申請日: 2011-08-26
• 公開（公告）號: CN102952863A
• 公開（公告）日: 2013-03-06
• 發明（設計）人: 章桂明;向才玉;凌杏園;潘廣;程穎慧;康林;李鶴遙
• 申請（專利權）人: 深圳出入境檢驗檢疫局動植物檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11;G01N30/02
• 代理公司: 深圳鼎合誠知識產權代理有限公司 44281
• 代理人: 羅瑤

1.用于轉基因棉花多重PCR-DHPLC檢測的引物，其特征在于：所述引物包括引物對1，以及引物對2、引物對3、引物對4中的至少一個；

引物對1的上游引物含有Seq?ID?No.1所示序列，下游引物含有Seq?ID?No.2所示序列；

引物對2的上游引物含有Seq?ID?No.3所示序列，下游引物含有Seq?ID?No.4所示序列；

引物對3的上游引物含有Seq?ID?No.5所示序列，下游引物含有Seq?ID?No.6所示序列；

引物對4的上游引物含有Seq?ID?No.7所示序列，下游引物含有Seq?ID?No.8所示序列；

Seq?ID?No.1：5’-TCCATGCCGCCTCACAAG-3’

Seq?ID?No.2：5’-CCCAGCCCTCCAAAGATT-3’

Seq?ID?No.3：5’-TTGAAATTAAAAACCAATGCCAC-3’

Seq?ID?No.4：5’-GATGTTAGTTTCCCATTCGAGTTT-3’

Seq?ID?No.5：5’-AACGGGCGGAAACCCTTG-3’

Seq?ID?No.6：5’-GCAATTACCTTACTGCCAATAAAGC-3’

Seq?ID?No.7：5’-TGTCATCTATGTTACTAGATCGGGG-3’

Seq?ID?No.8：5’-GCCGAACGCTGTTATCCTCAT-3’。

2.根據權利要求1所述的引物，其特征在于：所述引物對1-4的上游引物的5’端還包括Seq?ID?No.9所示序列，所述引物對1-4的下游引物的5’端還包括SeqID?No.10所示序列；

Seq?ID?No.9：5’-CGTGGCCTCGCGATCTGACT-3’

Seq?ID?No.10：5’-CTCAGCGGCGGAGCTACAGA-3’。

3.根據權利要求2所述的引物，其特征在于：

所述引物對1的上游引物具有Seq?ID?No.11所示序列，下游引物具有Seq?IDNo.12所示序列；

引物對2的上游引物具有Seq?ID?No.13所示序列，下游引物具有Seq?IDNo.14所示序列；

引物對3的上游引物具有Seq?ID?No.15所示序列，下游引物具有Seq?IDNo.16所示序列；

引物對4的上游引物具有Seq?ID?No.17所示序列，下游引物具有Seq?IDNo.18所示序列；

Seq?ID?No.11：5’-CGTGGCCTCGCGATCTGACTTCCATGCCGCCTCACAAG-3’

Seq?ID?No.12：5’-CTCAGCGGCGGAGCTACAGACCCAGCCCTCCAAAGATT-3’

Seq?ID?No.13：5’-CGTGGCCTCGCGATCTGACTTTGAAATTAAAAACCAATGCCAC-3’

Seq?ID?No.14：5’-CTCAGCGGCGGAGCTACAGAGATGTTAGTTTCCCATTCGAGTTT-3’

Seq?ID?No.15：5’-CGTGGCCTCGCGATCTGACTAACGGGCGGAAACCCTTG-3’

Seq?ID?No.16：5’-CTCAGCGGCGGAGCTACAGAGCAATTACCTTACTGCCAATAAAGC-3’

Seq?ID?No.17：5’-CGTGGCCTCGCGATCTGACTTGTCATCTATGTTACTAGATCGGGG-3’

Seq?ID?No.18：5’-CTCAGCGGCGGAGCTACAGAGCCGAACGCTGTTATCCTCAT-3’。

4.根據權利要求1-3任一項所述的引物，其特征在于：

所述引物對1為檢測棉花內源基因sad?I基因的引物，

引物對2為檢測轉基因棉花品系MON531的引物，

引物對3為檢測轉基因棉花品系MON1445的引物，

引物對4為檢測轉基因棉花品系MON15985的引物。