[發明專利]接骨片及其鑒別和含量測定方法

有效

• 申請號: 201110247948.3
• 申請日: 2011-08-26
• 公開（公告）號: CN102359992A
• 公開（公告）日: 2012-02-22
• 發明（設計）人: 姜華
• 申請（專利權）人: 通化正和藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N21/78;G01N30/90
• 代理公司: 通化旺維專利商標事務所有限公司 22205
• 代理人: 王偉

1.一種接骨片的鑒別和含量測定方法，接骨片由四號銅粉2.34g，川芎39g，制川烏39g，當歸39g，醋炙乳香39g，醋炙沒藥39g，煅自然銅39g原料藥制成1000片；制備方法為：以上七味，四號銅粉、制川烏、乳香、沒藥、自然銅粉碎成細粉，過篩混勻；川芎、當歸照流浸膏劑與浸膏劑項下的滲漉法用70％乙醇作溶劑，進行滲漉，漉液回收乙醇，減壓濃縮成膏；加入上述細粉及輔料，混勻，制成顆粒，60℃以下干燥，壓制成1000片，包糖衣，即得；其特征在于鑒別和含量測定方法如下：

一、鑒別：

(1)取本品3片，除去糖衣，研細，加硝酸5ml，攪勻，再加水5ml，濾過，取濾液1ml，加水4ml，加亞鐵氰化鉀試液1-2滴，即生成藍色沉淀。另取濾液1ml，加水4ml，加硫氰酸銨試液1滴，即顯血紅色；

(2)取本品24片，除去糖衣，研細，加乙醚50ml，超聲處理10分鐘，濾過，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取乳香對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚30～60℃-醋酸乙酯＝85∶15為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，在105℃烘至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的主斑點；

(3)取本品24片，除去糖衣，研細，加甲醇50ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液置水浴蒸干，水浴溫度80～90℃，殘渣加水30ml分散，水液轉移至分液漏斗中，用三氯甲烷振搖提取2次，棄去三氯甲烷液，水層用乙醚振搖提取2次，合并乙醚液，揮干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取川芎對照藥材0.5g，加甲醇20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液8～10μl及對照藥材溶液10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，105℃活化30分鐘，以甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲酸＝10∶1∶0.5∶1上層溶液為展開劑，飽和15分鐘，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

(4)取當歸對照藥材0.25g，加甲醇10ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液?揮干，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取對照藥材溶液及上述“鑒別(3)”項下的供試品溶液5～8μl及對照藥材溶液10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上105℃活化30分鐘，以甲苯-丙酮-乙酸乙酯-甲酸＝10∶0.5∶0.3∶0.5上層溶液為展開劑，飽和20分鐘，展開，取出，晾干，噴以1％香草醛硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；

(5)取本品8片，除去糖衣，研細，加石油醚60～90℃?15ml，超聲處理5分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取沒藥對照藥材0.1g，加甲醇10ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液3μl及對照藥材溶液10μl，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，105℃活化30分鐘，以甲苯-丙酮-甲酸＝8∶0.8∶1.5上層溶液為展開劑，置層析缸中飽和20分鐘，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱約8～10分鐘至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色斑點；

二、含量測定：

照高效液相色譜法測定；

色譜條件與系統適用性試驗：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈∶0.1％磷酸溶液＝150∶850，pH應為2.6為流動相，檢測波長為313nm，理論板數按阿魏酸峰計算應不低于3000；

對照品溶液的制備：取阿魏酸對照品約13mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取5ml，置50ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，制成每1ml含阿魏酸0.013mg的溶液，搖勻，即得；

供試品溶液的制備：取本品30片，除去糖衣，精密稱定，研細，取約3g，精密稱定，置索氏提取器中，加甲醇80ml，回流提取4小時，回收甲醇至干，殘渣加水20ml，用氨試液調pH10～11，用乙醚提取3次，每次20ml，棄去乙醚層，水層用鹽酸調pH2～3，用醋酸乙酯提取5次，每次20ml，合并提取液，用2％碳酸鈉溶液提取3次，每次30ml，合并提取液，用鹽酸調pH2～3，用醋酸乙?酯提取4次，每次30ml，合并提取液，蒸干，加甲醇使溶解并稀釋至5ml量瓶中，搖勻，即得；

測定：分別精密吸取對照品溶液及供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。?