[發(fā)明專利]通過mRNA誘導(dǎo)體細胞為多能干細胞的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110243254.2
• 申請日: 2006-10-16
• 公開（公告）號: CN102329779A
• 公開（公告）日: 2012-01-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 胡繼繁;李陶;姜舒;胡祥
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳市北科生物科技有限公司;胡繼繁
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;A61K35/12;A61K8/98
• 代理公司: 深圳市科吉華烽知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所 44248
• 代理人: 羅志強

1.一種通過mRNA誘導(dǎo)體細胞為多能干細胞的方法，該方法包括：

a.從多潛能細胞中提取mRNA；

b.將所述mRNA包封于至少一種脂質(zhì)體遞送劑中；

c.將體細胞暴露于所述mRNA脂質(zhì)體；

d.在板或者未涂層培養(yǎng)皿的蓋上倒置懸滴培養(yǎng)經(jīng)暴露的體細胞，持續(xù)足以加速細胞聚集的時間；

e.在稀釋的瓊脂糖凝膠上或者在未涂層的培養(yǎng)皿中混懸培養(yǎng)已聚集的細胞以形成EB；

f.在飼養(yǎng)細胞頂部上或者在涂層板和皿上或者在補充了生長因子的適宜培養(yǎng)基的基質(zhì)膠上培養(yǎng)EB樣細胞；以及

g.選擇具有干細胞形態(tài)的細胞集落，

籍此將所述體細胞去分化為多潛能細胞，用于細胞療法和化妝品應(yīng)用。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，步驟a的多潛能細胞是胚胎干細胞(ESC)、原始生殖細胞(PGC)、胎兒細胞、卵、受精卵、臍帶血干細胞、組織干細胞、小鼠胚泡細胞或者其組合。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，步驟d中充足的時間約為兩小時至過夜。

4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，步驟b和c用電穿孔所述體細胞以轉(zhuǎn)染來自多潛能細胞的mRNA所替代。

5.如權(quán)利要求4所述的方法，其中，電穿孔所述體細胞的步驟用通過病毒來病毒介導(dǎo)所述mRNA進入所述體細胞所替代。