[發(fā)明專利]一種高效誘導(dǎo)棉花體胚發(fā)生與植株再生的方法及其培養(yǎng)基

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110243204.4
• 申請日: 2011-08-23
• 公開（公告）號: CN102405835A
• 公開（公告）日: 2012-04-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 華金平;張園;劉正杰;王彥霞;王玉美
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;任鳳華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種高效誘導(dǎo)棉花體胚發(fā)生與植株再生的方法及其培養(yǎng)基。

背景技術(shù)

棉花是重要的經(jīng)濟作物，其細(xì)胞和組織培養(yǎng)研究已取得了很大的進展，并初步建立和完善了棉花組織培養(yǎng)的技術(shù)體系。棉花組織培養(yǎng)、離體再生作為棉花細(xì)胞工程和基因工程的基礎(chǔ)技術(shù)，在棉花遺傳改良中有著極為重要的作用。然而，棉花是較難通過體細(xì)胞胚胎發(fā)生途徑獲得再生植株的作物，表現(xiàn)為在組織培養(yǎng)中基因型依賴性強且周期長，重復(fù)性差。另外，在棉花體細(xì)胞胚胎發(fā)生過程中，體胚發(fā)生效率低且畸形胚胎頻率高。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種高效誘導(dǎo)棉花體胚發(fā)生與植株再生的方法及其培養(yǎng)基。

本發(fā)明所提供的培養(yǎng)基為用于獲得棉花體細(xì)胞再生植株的成套培養(yǎng)基，分為只由活性成分組成的便于存放的貯存型培養(yǎng)基和由所述貯存型培養(yǎng)基和水配成的即用型培養(yǎng)基。

所述用于獲得棉花體細(xì)胞再生植株的成套培養(yǎng)基，其中的貯存型培養(yǎng)基，由獨立包裝的培養(yǎng)基A、培養(yǎng)基B和培養(yǎng)基C組成；

所述培養(yǎng)基A為由改良MS基本培養(yǎng)基、激素、葡萄糖和凝固劑組成的培養(yǎng)基；

所述培養(yǎng)基B為由所述改良MS基本培養(yǎng)基、激素、葡萄糖和氨基酸添加物組成的培養(yǎng)基；

所述培養(yǎng)基C為由所述改良MS基本培養(yǎng)基、激素、葡萄糖、氨基酸添加物和凝固劑組成的培養(yǎng)基；

所述改良MS基本培養(yǎng)基由下述質(zhì)量份的營養(yǎng)成分組成：

NH₄NO₃?825份、KNO₃?3800份、KH₂PO₄?170份、CaCl₂·2H₂O?440份和MgSO₄·7H₂O370份；KI?0.83份、Na₂MoO₄·2H₂O?0.25份、H₃BO₃?6.2份、CuSO₄·5H₂O?0.025份、MnSO₄·4H₂O?22.3份、CoCl₂·6H₂O?0.025份和ZnSO₄·4H₂O?8.6份；Na₂EDTA?37.3份和FeSO₄·7H₂O?27.8份；煙酸0.5份、肌醇100份、鹽酸硫胺素0.1份、鹽酸吡哆素0.5份和甘氨酸2.0份；

所述激素為吲哚丁酸和激動素，所述吲哚丁酸和所述改良MS基本培養(yǎng)基在所述培養(yǎng)基A、培養(yǎng)基B和培養(yǎng)基C中的配比滿足0.3份-1.0份所述吲哚丁酸/825份NH₄NO₃，具體可為0.3份所述吲哚丁酸/825份NH₄NO₃或0.6份所述吲哚丁酸/825份NH₄NO₃或1.0份所述吲哚丁酸/825份NH₄NO₃；所述激動素和所述改良MS基本培養(yǎng)基在所述培養(yǎng)基A、培養(yǎng)基B和培養(yǎng)基C中的配比滿足0.05份-0.3份所述激動素/825份NH₄NO₃，具體可為0.05份所述激動素/825份NH₄NO₃或0.15份所述激動素/825份NH₄NO₃或0.3份所述激動素/825份NH₄NO₃；所述吲哚丁酸與所述激動素在所述培養(yǎng)基A、培養(yǎng)基B和培養(yǎng)基C中的質(zhì)量份之比均為(7.00-3.00)∶1，具體可為6∶1或4∶1或3.33∶1；

所述葡萄糖和所述改良MS基本培養(yǎng)基在所述培養(yǎng)基A、培養(yǎng)基B和培養(yǎng)基C中的配比滿足25000份-35000份所述葡萄糖/825份NH₄NO₃，具體可為25000份所述葡萄糖/825份NH₄NO₃或30000份所述葡萄糖/825份NH₄NO₃或35000份所述葡萄糖/825份NH₄NO₃；