[發明專利]基于熒光偏振分析的IP3受體靶標藥物的篩選方法

有效

• 申請號: 201110242141.0
• 申請日: 2011-08-23
• 公開（公告）號: CN102410995A
• 公開（公告）日: 2012-04-11
• 發明（設計）人: 丁兆
• 申請（專利權）人: 四川匯宇制藥有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 成都行之專利代理事務所(普通合伙) 51220
• 代理人: 譚新民;梁田

1.基于熒光偏振分析的IP₃受體靶標藥物的篩選方法，其特征在于，步驟如下：

A.提供熒光標記配體、作為競爭配體的待測化合物、以及3種包含IP₃結合結構域的受體多肽；分別為受體IBC、受體NT和受體V33K-NT；所述受體IBC是位于IP₃R受體224-604位的IP₃結合中心，所述受體NT是野生型的位于IP₃R受體1-604?位的IP₃受體N末端片段，所述受體V33K-NT是受體NT的33位氨基酸突變為賴氨酸的突變型IP₃受體N末端片段；

B．競爭結合分析實驗：將所述步驟A中的熒光標記配體、待測化合物、至少一種受體多肽置于容器內混合；

C．通過熒光偏振技術測定所述步驟B的容器在不同溫度下對應的熒光各向異性度A，計算對應溫度下待測化合物與相應受體多肽競爭結合時的平衡解離常數K_D值，根據平衡解離常數K_D值計算得到相應溫度下的焓變ΔH，每種受體的焓變ΔH分別表示為ΔH?_IBC、ΔH_NT?和ΔH_V33K；

D.計算ΔH?_IBC與ΔH_NT的差值，ΔH?_IBC與ΔH_NT的差值用Δ（ΔH_?IBC?-NT）表示，Δ（ΔH_?IBC?-NT）的絕對值越小，則待測化合物的藥效越強；或者計算ΔH_V33K和ΔH_NT的差值，ΔH_V33K和ΔH_NT的差值用Δ（ΔH_V33K-NT）表示，Δ（ΔH_V33K-NT）的絕對值越大，則待測化合物的藥效越強。

2.根據權利要求1所述的基于熒光偏振分析的IP₃受體靶標藥物的篩選方法，其特征在于，所述熒光標記配體是將熒光素通過共價鍵連接到IP₃制備的。

3.根據權利要求2所述的基于熒光偏振分析的IP₃受體靶標藥物的篩選方法，其特征在于，所述熒光標記配體是FITC-IP₃。