[發(fā)明專利]截短的IP3受體V33K-NT及其應用無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110242128.5 | 申請日： | 2011-08-23 |
| 公開（公告）號： | CN102286094A | 公開（公告）日： | 2011-12-21 |
| 發(fā)明（設計）人： | 丁兆 | 申請（專利權）人： | 四川匯宇制藥有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/705 | 分類號： | C07K14/705;G01N21/64 |
| 代理公司： | 成都行之專利代理事務所(普通合伙) 51220 | 代理人： | 譚新民;梁田 |
| 地址： | 641000 四川省內(nèi)*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | ip sub 受體 v33k nt 及其 應用 | ||
1.截短的IP3受體V33K-NT，為IP3R1的N末端1-604殘基的突變體，所述突變體的序列具有序列表中SEQ?ID?NO:3所述的氨基酸序列，其特征在于，其33位氨基酸是由纈氨酸突變?yōu)橘嚢彼帷?/p>
2.如權利要求1所述的一種截短的IP3受體V33K-NT的應用，其特征在于，所述截短的IP3受體V33K-NT用于IP3R靶向藥物的篩選。
3.如權利要求1所述的一種截短的IP3受體V33K-NT的應用，其特征在于，所述截短的IP3受體V33K-NT用于IP3R靶向藥物的篩選時，包括以下步驟：
A.提供熒光標記配體、作為競爭配體的待測化合物、以及3種包含IP3結(jié)合結(jié)構域的受體多肽；分別為受體IBC、受體NT和所述截短的IP3受體V33K-NT；所述受體IBC是位于IP3R受體224-604位的IP3結(jié)合中心，所述受體NT是野生型的位于IP3R受體1-604?位的IP3受體N末端片段；
B．競爭結(jié)合分析實驗：將所述步驟A中的熒光標記配體、待測化合物、至少一種受體多肽置于容器內(nèi)混合；
C．通過熒光偏振技術測定所述步驟B的容器在不同溫度下對應的熒光各向異性度A，計算對應溫度下待測化合物與相應受體多肽競爭結(jié)合時的平衡解離常數(shù)KD值，根據(jù)平衡解離常數(shù)KD值計算得到相應溫度下的焓變ΔH，每種受體的焓變ΔH分別表示為ΔH?IBC、ΔHNT?和ΔHV33K；
D.計算ΔH?IBC與ΔHNT的差值，ΔH?IBC與ΔHNT的差值用Δ（ΔH?IBC?-NT）表示，Δ（ΔH?IBC?-NT）的絕對值越小，則待測化合物的藥效越強；或者計算ΔHV33K和ΔHNT的差值，ΔHV33K和ΔHNT的差值用Δ（ΔHV33K-NT）表示，Δ（ΔHV33K-NT）的絕對值越大，則待測化合物的藥效越強。
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