[發(fā)明專利]一種siRNA輸送載體及其應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110240290.3
• 申請日: 2011-08-19
• 公開（公告）號: CN102329810A
• 公開（公告）日: 2012-01-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 黃開紅;陳茵婷
• 申請（專利權(quán)）人: 黃開紅;陳茵婷
• 主分類號: C12N15/63
• 分類號: C12N15/63;C12N15/113;C12N15/79;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利代理有限公司 44202
• 代理人: 戴建波

1.一種siRNA輸送載體，其中，所述輸送載體的活性成分為超順磁性氧化鐵納米粒子與聚乙二醇-聚乙烯亞胺偶聯(lián)形成的納米顆粒。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的siRNA輸送載體，其中，所述聚乙二醇-聚乙烯亞胺為單甲基醚聚乙二醇接枝支化聚乙烯亞胺形成的水溶性共聚物，所述水溶性共聚物通過配體交換包裹超順磁性氧化鐵納米粒子。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的siRNA輸送載體，其中，所述超順磁性氧化鐵納米粒子的分子量控制在40-60kD之間，聚乙二醇-聚乙烯亞胺的分子量控制在40-60kD之間。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的siRNA輸送載體，其中，所述納米顆粒的平均粒徑為60-80nm，表面zeta電位為30-40mV。

5.一種真核細胞轉(zhuǎn)染液，其中，所述轉(zhuǎn)染液包括siRNA和如權(quán)利要求1-4中任意一項所述的siRNA輸送載體，所述siRNA被吸附于siRNA輸送載體形成復合物。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的真核細胞轉(zhuǎn)染液，其中，所述復合物的N/P比值控制在5-20之間。

7.一種向細胞輸送siRNA的方法，其中，包括將siRNA與如權(quán)利要求1-4中任意一項所述的siRNA輸送載體制備成復合物，而后根據(jù)復合物粒徑、表面電位、siRNA復合能力、細胞毒性和轉(zhuǎn)染率確定合適的N/P比值，再用具有合適的N/P比值的復合物向細胞中轉(zhuǎn)染siRNA。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的向細胞輸送siRNA的方法，其中，siRNA為siCD44v6，所述siCD44v6具有如下序列：

sense?strand：5′-GAACAGUGGUUUGGCAACA?dTdT-3′<SEQ?ID?NO.1>，

antisense?strand：3′-dTdT?CUUGUCACCAAACCGUUGU-5′<SEQ?ID?NO.2>，

所述輸送載體與siCD44v6形成復合物，將復合物的N/P比值控制在5-15之間，向胃癌細胞轉(zhuǎn)染siCD44v6。

9.如權(quán)利要求1-4中任意一項所述的siRNA輸送載體在制備癌癥基因治療藥物中的應(yīng)用。

10.如權(quán)利要求5或6中所述的真核細胞轉(zhuǎn)染液在在制備癌癥基因治療藥物中的應(yīng)用。