[發明專利]一種聯合高壓靜電液滴法和層層自組裝法制備自組裝載藥微球的方法

有效

• 申請號: 201110239757.2
• 申請日: 2011-08-19
• 公開（公告）號: CN102258481A
• 公開（公告）日: 2011-11-30
• 發明（設計）人: 薛巍;何留民;左琴華;謝莎莎;黃躍新;施云峰;張奕
• 申請（專利權）人: 薛巍
• 主分類號: A61K9/16
• 分類號: A61K9/16;A61K38/18;A61K47/36;A61J3/00
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 邱奕才

技術領域

????本發明涉及微球制備方法領域，具體涉及一種聯合高壓靜電液滴法和層層自組裝法制備自組裝載藥微球的方法。

背景技術

????生長因子是一類能刺激靶細胞產生某些生物效應的生物活性多肽或蛋白質，目前此類蛋白質藥物主要包裹方式是采用有機溶媒如氯仿、二氯甲烷制備的高分子微球，會有遇到蛋白藥物穩定性降低的問題，同時也會出現藥物突釋等問題。如何采用相對溫和的條件包裹蛋白質藥物保持其長效活性，并且實現可控釋放，是目前藥物載體系統研究的一個重要方向。

發明內容

????本發明的目的在于根據現有包括生長因子的藥物載體中存在的穩定性降低、藥物突釋等問題，提供一種穩定性好、具有長效活性且可控釋放的自組裝載藥微球的制備方法。

????本發明上述目的通過以下技術方案予以實現：

????本發明以水溶性聚合物為囊材，包括蛋白質藥物，采用高壓靜電使其分散成一定粒徑的霧滴狀膠囊，可避免使用傳統乳化成囊法所需的有機溶媒。利用相同的原理，將含有蛋白質藥物的海藻酸鈉溶液在高壓電場力的作用下分散成小液滴，使之與堿土金屬離子交聯形成微水凝膠，可以實現無毒包裹，并得到表面光滑、圓整、均勻性好的微球。

一種聯合高壓靜電液滴法和層層自組裝法制備自組裝載藥微球的方法，包括如下步驟：

（1）以含有生長因子的海藻酸鈉水溶液為原料液，以氯化鈣溶液為凝膠浴，在高壓靜電場裝置中制備微凝膠；

（2）用靜電納米層層自組裝技術在微凝膠表面組裝多層高分子聚電解質膜，得到自組裝載藥微球；

步驟（1）中，所述高壓靜電場裝置由靜電場發生器和注射器泵組成，所述原料液裝入注射器泵上，將靜電場發生器正極與注射器銳孔連接，負極與氯化鈣凝膠浴連接，使銳孔和凝膠浴之間形成靜電場；靜電場發生器輸出電壓，在注射器泵的推動力和電場力的作用下，原料液克服黏滯力和表面張力，從銳孔以液滴狀滴入氯化鈣溶液中固化，形成包封了含有生長因子的海藻酸鈣的微凝膠，生長因子會均勻分布于微凝膠中；

步驟（2）中，將微凝膠置于殼聚糖溶液中成膜反應后，去離子水洗除去未吸附的殼聚糖，再將其置于右旋糖酐硫酸鈉溶液中成膜反應，再用去離子水洗除去未吸附的右旋糖酐硫酸鈉，重復上述操作，逐層吸附殼聚糖和右旋糖酐硫酸鈉，得到所需層數的自組裝載藥微球。

作為一種優選方案，上述方法中，所述原料液含10ug/ml的bFGF和2wt%的海藻酸鈉。

作為一種優選方案，上述方法中，所述靜電場發生器的輸出電壓為15kV。

作為一種優選方案，上述方法中，所述成膜反應的時間為15min；所述洗脫時間為30s。

作為一種優選方案，上述方法中，所述殼聚糖溶液中含有0.1質量體積%的殼聚糖，pH值為5.6。

作為一種優選方案，上述方法中，所述右旋糖酐硫酸鈉溶液中含有0.1質量體積%的右旋糖酐硫酸鈉，pH值為5.6。

與現有技術相比，本發明具有如下有益效果：

（1）將含有蛋白質藥物的海藻酸鈉溶液在高壓電場力的作用下分散成小液滴，使之與堿土金屬離子交聯形成微水凝膠，可以實現無毒包裹，并得到表面光滑、圓整、均勻性好的微球；

（2）本發明通過層層自組裝方法可以改變納米層的厚度及組成，進而保護生長因子活性，并能有效避免突釋，實現長效恒速率釋放；而且，早期微球中生長因子的釋放屬于擴散機制，生長因子穿過表面的聚電解質多層納米膜進行釋放；在釋放后期，海藻酸鹽微凝膠由于交聯點密度降低，出現基體崩解，同時聚電解質多層納米膜發生降解，因此生長因子的釋放同時受到擴散及降解兩種機制調控，進而實現生長因子的控釋；

（3）本發明的層層自組裝這種層疊方式主要通過靜電相互作用成囊，是一種弱相互作用力，基本上不會影響包載藥物的性質，這對于穩定性差、生物半衰期短的多肽類藥物來說，非常適合包載。

附圖說明

????圖1為高壓靜電液滴法制備微球的裝置圖；

????圖2為納米層層自組裝技術路線；

????圖3為本發明經過自組裝后生長因子的釋放速率。

具體實施方式

????以下結合實施例來進一步解釋本發明，但實施例并不對本發明做任何形式的限定。

實施例

實驗材料：