[發明專利]一種提取銀杏葉有效成分的生產方法

有效

• 申請號: 201110238230.8
• 申請日: 2011-08-18
• 公開（公告）號: CN102293791A
• 公開（公告）日: 2011-12-28
• 發明（設計）人: 趙守明;姜新宇;羅帆
• 申請（專利權）人: 湖南麓山天然植物制藥有限公司
• 主分類號: A61K36/16
• 分類號: A61K36/16;A61P9/00;A61P9/10;A61P7/02;A61K127/00
• 代理公司: 長沙市融智專利事務所 43114
• 代理人: 潘傳軍

技術領域

本發明涉及一種提取植物中有效成分的生產方法，特別涉及一種提取能治療心腦血管疾病的銀杏葉有效成分的生產方法，屬于中藥制備領域。

背景技術

銀杏是世界上最古老的孑遺植物，素有“活化石”和“植物界的熊貓”之稱，我國是銀杏的故鄉，銀杏含量占世界總量的70％以上。銀杏樹的果實和葉子均有很高的藥用價值和食用價值。據《本草綱目》記載，銀杏“熟食溫肺益氣，定喘嗽，縮小便，止白濁；生食降痰、消毒、殺蟲″。目前銀杏葉提取物廣泛用于改善心腦血管功能。銀杏是最早被國外研究者認識和被廣泛認同的中草藥之一，其制劑是世界上最暢銷的植物藥。

銀杏葉中含量最高的是黃酮類物質，萜內酯是銀杏特有的結構復雜的化合物，從銀杏葉中提取的黃酮類和萜內酯類等有效成分對治療冠心病、腦血栓心腦血管疾病有明顯效果。目前，銀杏黃酮化合物的提取方法有水提取、有機溶劑提取、超臨界流體提取等方法。水提法成本低，但提取率差，原料采用率不高；有機溶劑提取成本高，雜質含量高；超臨界流體法雖提取率高，但因設備昂貴，普及受限制，CN101708195A專利于2010年5月19日公開了一種銀杏提取物的生產工藝，但這種工藝仍然存在銀杏葉有效成分提取率不高，不環保等缺陷，且這種工藝提取銀杏葉有效成分黃酮類物質的含量最高只能達到24.5％，因此，急需一種能有效提高銀杏葉中黃酮類物質含量的生產方法。

發明內容

為克服現有技術存在的提取銀杏葉有效成分提取率低、不環保等缺點，本發明提供了一種能有效提高銀杏葉有效成分提取比率的生產方法。

為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：一種提取銀杏葉有效成分的生產方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)酶解銀杏葉：將銀杏葉原料粉碎成粗粉后，與酶解液混合均勻，在30～60℃的溫度下酶解1～2天；

(2)提取銀杏葉有效成分：將酶解好的銀杏粉加入乙醇，在70～85℃的溫度下回流提取1次，再加入轉苷酶和相應糖基配體物質，然后加入乙醇，在50-60℃的溫度下回流提取1次，過濾，合并兩次的提取液后回收乙醇，脫脂；合并兩次的提取液后回收乙醇，脫脂；

(3)上柱層析：將脫脂后的提取液通過大孔吸附樹脂柱層析，然后依次用水洗脫一次，用乙醇洗脫至少三次，用鹽酸鎂粉試驗洗脫液成陽性段后，合并洗脫液，回收乙醇，濃縮成膏狀后干燥。

將銀杏葉原料粉碎成顆粒后，增大了物料與酶解液及提取溶劑接觸的比表面積，使原料充分溶解于溶劑中，能提高提取率。

溫度對酶具有雙重影響，因而合適的溫度能夠使酶發揮其最大活性，同時也能保持其較好的穩定性，對細胞壁進行裂解，致使溶劑溶解黃酮類化合物向細胞表面擴散時，阻力減小，有利于向溶劑主體擴散，提高銀杏總黃酮的提取率，在30～60℃的溫度下進行酶解，有利于在保持酶的穩定性的同時使酶發揮最大活力，使浸提效果達到最佳；浸提溫度與浸提速率成正比，溫度升高能減小乙醇溶劑的粘度，從而提高銀杏黃酮的提取效率；但是溫度太高有可能破壞黃酮的熱穩定性，雜質溶出的概率也增大，反而會降低浸提效果，因此保持合適的溫度就變得很重要，本發明將溫度控制在70～85℃是最佳的浸提溫度。

進一步的，所述步驟(1)中的酶解液為水和酶的混合物，水和酶的質量比為100∶1；酶解液的水與銀杏葉粉的質量比為2∶1。

優選的，所述的酶為轉苷酶或纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶、復合酶中的一種與轉苷酶的混合物。

銀杏葉中的黃酮類化合物和萜內酯主要包裹在以纖維素為主構成的細胞壁內，單獨的乙醇提取法無法使細胞壁完全破裂，致使銀杏葉有效成分的溶出存在相當的阻力，導致提取效果受到很大的影響。將銀杏葉進行酶預處理，酶能破壞銀杏葉的細胞壁，使細胞壁松散、破裂，因而能減小銀杏葉有效成分化合物的溶出阻力，使銀杏葉的有效成分充分溶解，縮短提取時間，增強有效成分的提取效果。轉苷酶可使銀杏葉中一些酯溶性有效成分轉化為帶糖基的親水性成分而提高收得率。在30～60℃的溫度下對銀杏葉進行酶解處理，能使纖維素酶或半纖維素酶或果膠酶或復合酶與轉苷酶的混合物保持良好的活性，達到酶解處理的預期效果。酶解后的銀杏葉粉在經過乙醇提取后，相對于其它方法得到的提取液，大分子物質相對較少，便于過濾，使樹脂孔內雜質減少，在層析過程中不會堵塞樹脂孔，使層析更充分，雜質分離更徹底。