[發明專利]小桐子快速繁殖方法有效
| 申請號: | 201110237661.2 | 申請日: | 2011-08-18 |
| 公開(公告)號: | CN102405832A | 公開(公告)日: | 2012-04-11 |
| 發明(設計)人: | 孫懷娟;孔曉香;李艷梅;陳小蓮;李耿光 | 申請(專利權)人: | 普羅米綠色能源(深圳)有限公司 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 深圳市維邦知識產權事務所 44269 | 代理人: | 黃莉 |
| 地址: | 518057 廣東省深圳市南山*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 桐子 快速 繁殖 方法 | ||
技術領域
本發明涉及生物組培育苗技術領域,尤其涉及一種小桐子快速繁殖方法。
背景技術
小桐子(Jatropha?curcas?L.),又叫麻瘋樹、麻風樹、膏桐、黑皂樹、木花生、油蘆子、亮桐、臭梧桐等,屬大戟科(Euphorbiaceae)麻瘋樹屬(Jatropha?L.),落葉灌木或小喬木,是一種多年生木本油料植物。小桐子原產美洲,廣泛分布于熱帶亞熱帶地區。
小桐子可全株開發,其果實、枝、葉均能利用。小桐子種子含油率高,經過加工可制成生物柴油。小桐子種子、樹皮、葉、根和乳汁中含有多種成分的生物藥源,可提取制作生物醫藥和生物農藥。小桐子種子加工后的油餅蛋白質含量較高,脫毒后可制作生物飼料,未脫毒的可制作優質的有機生物肥。另外,小桐子莖葉有毒,牲畜不吃,病蟲較少,不易燃燒,可作為田間地邊的生物籬和防風防火屏障。培育小桐子能源林,利用其種子提煉生物柴油是小桐子產業發展的主要方向。
我國現有栽培和半野生的小桐子,其繁殖主要靠種子繁殖和扦插繁殖,繁殖周期長、成本高。又因其為木本植物,采用常規育種來改變其遺傳性狀相當困難,因此采用現代生物技術如轉基因技術等成為首選。一些國家和地區已經開始了對小桐子進行了分子水平的育種工作。選育的優良品種大量繁殖,通過組培方式快速繁殖小桐子將在小桐子選育種生產上有重要的應用價值。
目前,關于小桐子的組織培養及快速繁殖的報道較多,例如:陸偉達、魏琴、唐琳等發表的《麻瘋樹愈傷組織的誘導及快速繁殖》(《應用與環境生物學報》,2003,9(2):127~130.)以及陳金洪、高敏、黃記生發表的《麻瘋樹莖段離體培養及快速繁殖研究》(《廣西農業科學》,2006,37(3):221~223.)等論文均涉及小桐子的組織培養及快速繁殖技術。但是,現有技術存在以下不足:
1、均采用不同的激素濃度組合誘導愈傷組織和芽分化,未經過再生芽增殖,其增殖速率低;
2、均采用不同外植體誘導愈傷組織,其不同外植體誘導頻率相差及大。
采用上述方法不能達到工廠化生產的需要,另有研究者進行了腋芽快繁研究,例如:李化、曾妮、賈勇炯等人發表的《麻瘋樹的促腋芽分枝快繁及生根誘導》(《四川大學學報:自然科學版》,2006,43(5):1116~1120.),所用外植體為種子萌發的胚芽來誘導增殖。但尚未見公開采用再生芽來誘導增殖的繁殖技術。
發明內容
本發明實施例所要解決的技術問題在于,提供一種小桐子快速繁殖方法,以通過組織培養大規模高效地生產小桐子。
為解決上述技術問題,本發明提供如下技術方案:一種小桐子快速繁殖方法,包括如下步驟:
準備再生芽步驟,以小桐子成熟種子為材料,經培育獲得無菌再生芽;
增殖誘導步驟,將再生芽切下,接入增殖培養基進行增殖培養,從而獲得增殖的叢芽;
伸長培養步驟,將增殖后的叢芽切下,接入伸長培養基進而獲得莖葉伸長的均勻的芽;
壯苗培養步驟,將伸長后的芽接入壯苗培養基進行壯苗培養;
生根移栽步驟,選取壯苗培養后莖葉生長均勻的芽切下,用吲哚丁酸浸泡后再接入生根培養基進行生根培養,生出符合移栽要求的根后進行煉苗移栽。
進一步地,所述誘導增殖步驟中,增殖培養基的成分為:MS+0.1~2?mg/L?6-芐基嘌呤+0.01~2?mg/L吲哚丁酸+0~5?mg/L的硝酸銀,附加3%蔗糖和0.7%瓊脂,pH5.8。
進一步地,所述誘導增殖步驟中,培養條件是:溫度控制在24~26℃,光照時間為12?h/d培養20~50天,光照強度為1600~2000?lx。
進一步地,所述伸長培養步驟中,伸長培養基成分為:MS?+0.1~2?mg/L?6-芐基嘌呤和0~1?mg/L的赤霉素,附加3%蔗糖和0.7%瓊脂,pH5.8。
進一步地,所述伸長培養步驟中,培養條件是:溫度控制在24~26℃,光照時間為12?h/d培養10~30天,光照強度為1600~2000?lx。
進一步地,所述壯苗培養步驟中,壯苗培養基中含有:MS+0.1~2?mg/L?6-芐基嘌呤+0.01~2?mg/L?吲哚丁酸+0~5?mg/L的硝酸銀+0~10?%椰汁。
進一步地,所述壯苗培養步驟中,培養條件為:溫度控制在24~26℃,光照時間為12?h/d培養10~30天,光照強度為1600~2000?lx。
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