[發(fā)明專利]一種粗壯脈紋孢菌及其孢子中天然類胡蘿卜素的提取方法

無效

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• 申請日: 2011-08-18
• 公開（公告）號: CN102352120A
• 公開（公告）日: 2012-02-15
• 發(fā)明（設計）人: 鄧澤元;劉志剛;李靜
• 申請（專利權）人: 南昌大學
• 主分類號: C09B61/00
• 分類號: C09B61/00
• 代理公司: 南昌市平凡知識產權代理事務所 36122
• 代理人: 張文杰

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技術領域

本發(fā)明是一種從粗壯脈紋孢菌（Neurospora.crassa）及其孢子中提取天然類胡蘿卜素的方法，屬天然色素添加劑生產加工領域。

背景技術

天然類胡蘿卜素主要作為天然色素和營養(yǎng)強化劑使用，可防止人體維生素A缺乏和預防眼病等。近年來研究表明，類胡蘿卜素在防癌抗癌、預防心血管疾病和延緩衰老等方面有明顯作用，目前已廣泛應用于食品及飼料添加劑、醫(yī)藥保健和化妝品等行業(yè)，同時天然色素具有合成色素所無法比擬的生理功能和安全性，非常迎合當今綠色、環(huán)保的潮流，是目前國際市場頗受歡迎的產品，具有非常廣闊的市場前景。

粗壯脈紋孢菌（Neurospora.crassa），屬真菌門，真子囊菌亞綱，鹿角菌目，糞殼菌科，脈紋孢菌屬。粗壯脈紋孢菌可產較高產量的類胡蘿卜素，其色素在菌體和成熟孢子中都有分布，特別是在其成熟孢子中，類胡蘿卜素含量可達0.25～0.3%。同時該菌生長所需營養(yǎng)簡單，生長周期短，培養(yǎng)過程易操作控制，因此，其在類胡蘿卜素的發(fā)酵生產方面具有很大的應用前景。但該菌所產色素為胞內色素，分生孢子壁厚且堅硬，直接用有機溶劑浸提很難將其中的類胡蘿卜素提取出來，且類胡蘿卜素對光照、溫度及氧氣等因素敏感，繁雜的提取工藝容易造成類胡蘿卜素在提取過程中的損失，因此簡單、高效、快速的提取工藝對類胡蘿卜素的提取非常重要。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的是提供一種操作簡單，高效，成本低，色素提取率高的粗壯脈紋孢菌中類胡蘿卜素的提取工藝。

本發(fā)明的具體工藝步驟：

(1)??粗壯脈紋孢菌及其孢子經30～80℃干燥后，將培養(yǎng)物粉碎為粗粉狀，過20～100目篩；

(2)??培養(yǎng)物粗粉和孢子粉用0.1～3mol/L鹽酸溶液常溫酸法破壁30s～30min，鹽酸溶液加入量為0.1～5L/kg培養(yǎng)物或孢子；

(3)??酸法破壁結束后水洗至中性，經擠壓過濾或減壓抽濾得濾渣；

(4)??濾渣用丙酮或乙酸乙酯等有機試劑浸提1～60min，料液比為5～50L/kg濾渣，浸提兩次，合并提取液；

（5）提取液經減壓蒸發(fā)回收溶媒后即得類胡蘿卜素粗提物，減壓蒸發(fā)溶媒溫度為30～70℃。

本發(fā)明的主要特點是針對粗壯脈紋孢菌（Neurospora.crassa）及其孢子特殊的細胞/孢子壁結構，用較低濃度的鹽酸溶液在溫和條件下快速破壞其中的多糖及蛋白等組分，在短時間內達到較好的破壁和色素提取效果。

本發(fā)明的有益效果是：1、所需鹽酸溶液的濃度低，耗用量少，破壁時間短，效率高，類胡蘿卜素破壞少，可快速提取粗壯脈紋孢菌（Neurospora.crassa）及其孢子中類胡蘿卜素，色素提取率高；2、工藝簡單，操作簡便，條件溫和，所用時間短，提取效率高，成本低；?3、所提色素色澤好，純度高，可作為食品、飼料、醫(yī)藥及相關領域天然色素添加劑使用。?

具體實施方式

實施例一：

粗壯脈紋孢菌固態(tài)培養(yǎng)物經45～60℃干燥后粉碎，粗粉物過40目篩，培養(yǎng)物粗粉用0.8mol/L鹽酸溶液常溫酸法破壁1～5min，酸液加入量為0.5～2L/kg培養(yǎng)物，破壁結束后水洗，擠壓過濾或減壓抽濾，重復水洗及過濾操作兩次至中性，所得濾渣用丙酮浸提5～10min，料液比為5～10L/kg濾渣，浸提兩次，合并提取液，提取液經45～50℃減壓蒸發(fā)回收溶媒后即得類胡蘿卜素粗提物。色素提取率可達98%以上。

實施例二：

粗壯脈紋孢菌孢子經45～60℃干燥后用0.8mol/L鹽酸溶液常溫酸法破壁1～3min，酸液加入量為1.0～3.0L/kg孢子，破壁結束后水洗，擠壓過濾或減壓抽濾，重復水洗及過濾操作兩次至中性，所得濾渣用丙酮浸提5～8min，料液比為35～50L/kg濾渣，浸提兩次，合并提取液，提取液經45～50℃減壓蒸發(fā)回收溶媒后即得類胡蘿卜素粗提物。色素提取率可達96%以上。

實施例三：

粗壯脈紋孢菌液態(tài)培養(yǎng)物經水洗、過濾后所得菌絲體用1.0mol/L鹽酸溶液常溫酸法破壁5～10min，酸液加入量為1.0～2.0L/kg菌絲體，破壁結束后水洗，擠壓過濾或減壓抽濾，重復水洗及過濾操作兩次至中性，所得濾渣用乙酸乙酯浸提8～10min，料液比為15～25L/kg濾渣，浸提兩次，合并提取液，提取液經45～50℃減壓蒸發(fā)回收溶媒后即得類胡蘿卜素粗提物。色素提取率可達95%以上。?