[發明專利]以嫩莖為外植體的滇楊組織培養方法無效
| 申請號: | 201110236831.5 | 申請日: | 2011-08-18 |
| 公開(公告)號: | CN102246700A | 公開(公告)日: | 2011-11-23 |
| 發明(設計)人: | 辛培堯;胥輝;段安安;李根前;周軍;何承忠;劉巖 | 申請(專利權)人: | 西南林業大學 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00;A01G31/00 |
| 代理公司: | 昆明科陽知識產權代理事務所 53111 | 代理人: | 孫山明 |
| 地址: | 650224 云南*** | 國省代碼: | 云南;53 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 外植體 組織培養 方法 | ||
1.以嫩莖為外植體的滇楊組織培養方法,包括以下步驟:
(1)取生長健壯、無病蟲害的3年生滇楊枝條,摘除枝條上葉片,置于室溫下水培一個月,待其長出嫩莖后剪下作為外植體;
(2)將步驟(1)嫩莖置入燒杯中,加入2%次氯酸鈉,振蕩6min,無菌水沖洗3遍,再加70%酒精消毒40s,之后加0.1%HgCl2消毒7?min,最后用無菌水沖洗5遍;?
(3)用MS+6BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L作為滇楊嫩莖不定芽誘導的分化培養基,將步驟(2)消毒后的無菌嫩莖平放入該培養基,20~25天生長出愈傷組織,約30天在愈傷上長出叢生不定芽;?
(4)用MS+6BA0.1mg/L+NAA0.02mg/L作為滇楊增殖培養基,將步驟(3)誘導后產生的不定芽接入該培養基,25天左右培養一代;?
(5)用1/2MS+NAA0.02mg/L作為滇楊生根培養基,將步驟(4)增殖培養后的壯苗插入該培養基,培養生根苗,15天左右生根;
(6)將步驟(5)的生根瓶苗在組織培養室培養25天,轉到普通實驗室內閉瓶培養3天、開瓶培養2天進行煉苗前預處理,然后移栽到基質中煉苗;
以上步驟(2)~(5)消毒接種工作均在超凈工作臺中操作,試管苗的培養均在組織培養室內進行,其培養條件為:溫度25±2℃、光照1500-2000Lx、光照時間12h/d、濕度70%~80%。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征是步驟(6)用于煉苗的基質的配方為:河沙:腐質土:珍珠巖=1:1:1。
3.根據權利要求1或2所述的方法,其特征是步驟(6)用于煉苗的基質以0.3?%的高錳酸鉀溶液淋溶消毒,蓋上小棚膜,7天后移栽煉苗。
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