[發明專利]一種植物內生真菌球毛殼菌株、微生物菌劑及其應用

有效

• 申請號: 201110232477.9
• 申請日: 2011-08-03
• 公開（公告）號: CN102311925A
• 公開（公告）日: 2012-01-11
• 發明（設計）人: 高克祥;劉曉光;米士偉;畢建杰;張修國
• 申請（專利權）人: 山東農業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01P3/00;A01P21/00;C12N3/00;C12R1/645
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技術領域

本發明屬于農業微生物領域，涉及的球毛殼(Chaetomium?globosum)ND35菌株是一種具有多機制和廣譜性抑制植物病原菌以及促進植物生長能力的植物內生真菌菌株，可用于研發具有防治多種植物病害的生物殺菌劑產品和促進植物生長的多功能生物菌肥產品。?

背景技術

利用微生物活體菌劑防治植物病害是傳統的生防技術之一，目前商品化的生防真菌主要是木霉菌等。雖然在生產上應用取得了一定的效果，但田間應用往往由于各種環境因素的影響而導致防病效果不穩定。其中主要原因是木霉菌的孢子粉制劑為其無性型分生孢子，容易失去活力，貨架期較短，嚴重影響田間的生防效果。尋找生活力強、貨架期長且具有生防機制多樣性的新型高效生防菌株是當務之急。?

毛殼屬真菌(Chaetomium?spp.)是子囊菌重要屬之一，球毛殼(CC.globosum)、螺卷毛殼(C.cochliodes)、繩生毛殼(C.funicola)和銅毛殼(C.cupreum)等能產生毛殼素、球毛殼素等多種抗生素，具有抗真菌和細菌活性(Brewer?et?al.，1972；Di?Pietro?et?al.，1992；Aggarwal?et?al.，2004)。用毛殼處理種子或植物，可促進植物生長并獲得高產。能抑制20多屬的植物病原真菌，包括引起農作物種子腐爛和種苗猝倒的腐霉菌、立枯絲核菌、鐮刀菌和引起蔬菜和大田作物以及林木、果樹病害的灰霉病菌、瓜果腐霉、辣椒疫霉、小麥穎枯病菌、大麥白粉病菌、稻瘟病菌、甘蔗紅腐病菌、玉米彎孢葉斑病菌、楊樹腐爛病菌、蘋果樹腐爛病菌、蘋果炭疽病菌等。在國外，已經用于蘋果黑星病、歐洲赤松幼苗猝倒病等病害的田間生物防治試?驗(Cullen?et?al.，1984；)。?

植物內生真菌是生活在植物體內，而不引起明顯侵染癥狀的微生物。它們與植物長期協同進化是互惠共生的關系。已有的研究表明，在沒有菌根真菌存在的環境中，內生真菌可以起到替代菌根真菌的促生防病作用。分離自健康毛白楊的內生真菌球毛殼ND35菌株是一個經過多年篩選研究得到的優良生防菌株。該菌株經誘導產生的粗酶液和抗生物質粗提液均能明顯抑制多種植物病原真菌菌絲的生長和孢子萌發。掃描和透射電鏡觀察到，ND35能纏繞、侵入立枯絲核菌菌絲內部，降解細胞質。免疫細胞化學標記證明，幾丁質酶和β-1，3-葡聚糖酶在重寄生過程中起重要作用(Gao?et?al.，2005)。另外，球毛殼ND35菌株還能對楊樹、核桃、板栗、番茄、黃瓜等植物的生長發育有明顯的促進作用。毛殼菌在自然界廣泛分布，具有廣譜拮抗性和較強抗逆性。子囊孢子壽命長，對干燥、低溫等不良環境的抵抗力強。子囊孢子在空氣中干燥2.5年，萌發率仍大于90％(劉曉光等，1999)。這一特性為延長活菌劑型生防產品的貨架期提供了保證。因而，毛殼菌是一種理想的生防益菌。?

發明內容

本發明的目的是為了克服已有的生防菌株生活力不強，生防機制單一，貨架期短而提供一種具有廣譜高效抑制植物病原菌和促進多種植物生長的能力，適合工業化生產，貨架期長，適用于植物病害生物防治的球毛殼(Chaetomium?globosum)優良菌株。該菌株可用于生產具有促生防病功能的多種生防產品。?

為解決上述問題，本發明是通過如下技術方案實現的：?

(一)本發明的球毛殼真菌菌株?

1、本發明的球毛殼真菌菌株被命名為球毛殼(Chaetomium?globosum)菌株ND35，保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地?址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，保藏日：2010年9月2日，保藏號為CGMCC?No.4136。其有性態屬于子囊菌門、核菌綱、球殼目、毛殼科、毛殼屬。?

2、本發明所述的球毛殼ND35菌株的培養特征?

本發明球毛殼ND35菌株分離自本地白楊樹，菌株在馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養基(PDA)上培養，初期白色較濃密，后期淡褐色。在25℃條件下，5-6天菌落在PDA平板上擴展9cm，7天后從中心區域向外開始漸進產生子囊果，顏色逐漸變為橄欖綠色、橄欖褐色。15天后多個成熟子囊果聚集，密布整個PDA平板，在聚集的子囊果上方有肉眼可見稀疏輻射狀的淺色菌絲覆蓋(圖1)。?

3、本發明所述的球毛殼ND35菌株的顯微形態和超微結構特征?