[發明專利]一株飼用丁酸梭菌及其應用

有效

• 申請號: 201110230736.4
• 申請日: 2011-08-12
• 公開（公告）號: CN102321552A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發明（設計）人: 張東曉;梁運祥;趙述淼;唐澤華;謝樹貴;雷紅升;付生慧;游偉;方莉玉
• 申請（專利權）人: 北京金泰得生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K1/16;A61K35/74;A61P31/00;C12R1/145
• 代理公司: 北京尚誠知識產權代理有限公司 11322
• 代理人: 魯兵

技術領域

本發明屬于微生物菌株，特別是涉及一株丁酸梭菌菌株及其在制備飼料及飼料添加劑中的應用。

背景技術

丁酸梭菌(Clostridium?butyricum)又稱酪酸梭菌或丁酸梭狀芽孢桿菌，是存在于人和畜禽腸道的一種厭氧有益菌。丁酸梭菌能形成內生芽孢，具有耐高溫、耐胃酸、耐膽鹽、耐部分抗生素(如慶大霉素、卡那霉素等)等特性。丁酸梭菌制劑作為飼料添加劑或獸藥，與非芽孢類活菌制劑相比具有顯著優勢。

目前，有關丁酸梭菌的研究和應用還處于初級階段，專利文獻CN?101851596A公開了一株高效解磷的丁酸梭菌及其制備方法和應用；專利文獻CN?1246144A公開了一種對肝臟損害具有治療和預防效果的丁酸梭菌；專利文獻CN?1995330A公開了一種丁酸梭狀芽孢桿菌微生態制劑的生產方法；專利文獻CN?1771831A公開了一種飼料級微生物添加劑及其制備與應用，所述的微生物添加劑主要包括益生菌部分和營養液部分，所述的益生菌部分含有嗜酸乳桿菌、糞腸球菌、丁酸梭菌，所述的營養液部分含有乙酸、丙酸、丁酸；專利文獻CN?1403567A公開了一種制備乳酸芽孢、丁酸芽孢桿菌活菌制劑的新方法，利用酶生物技術處理植物蛋白原料制得培養基，用于乳酸芽孢、丁酸芽孢桿菌單獨發酵培養，發酵物經離心、賦形、常溫以上溫度干燥制得乳酸芽孢、丁酸芽孢桿菌的干粉活菌制劑。上述專利文獻中公開的丁酸梭菌微生態制劑均未涉及丁酸梭菌先進行厭氧液態發酵、再用固體物料(麩皮、豆粕、稻殼等)吸附、最后烘干的工藝。

發明內容

本發明的目的是提供一株對致病菌具有抑制作用的可用于制備飼料和飼料添加劑的丁酸梭菌。

本發明所提供的丁酸梭菌(Clostridium?butyricum)菌株的名稱為B1，該菌株已于2011年05月16日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC?No.4845。

丁酸梭菌(Clostridium?butyricum)B1?CGMCC?No.4845是革蘭氏陽性桿菌，光學顯微鏡下觀察，其大小為(0.6～1.2)μm×(3.0～7.0)μm，端圓，中間部分輕度膨脹，單個或成對，短鏈，偶見有絲狀菌體，周生鞭毛，能運動；孢子卵圓，偏心或次端生芽孢；在厭氧瓊脂平板上形成白色或奶油色的小規則圓形菌落；在厭氧條件下生長，生長溫度范圍：20℃～60℃，最適生長溫度：30℃～42℃；生長酸堿度范圍：pH?2～10，最適pH值為7.0；部分生化特性如表1所示：

表1丁酸梭菌(Clostridium?butyricum)B1?CGMCC?No.4845的部分生化特性

注：“+”表示反應陽性；“-”表示反應陰性。

體外拮抗試驗結果表明：丁酸梭菌(Clostridium?butyricum)B1?CGMCC?No.4845對大腸桿菌(Escherichia?coli?O139、E.coli?K88、E.coli?K99)、傷寒沙門氏菌(Salmonella?typhimurium?O4Hi)和金黃色葡萄球菌(Staphylococcus?aureus)等均有很強的抑制作用。

丁酸梭菌(Clostridium?butyricum)B1?CGMCC?No.4845可耐受pH?1.0～3.0磷酸鹽緩沖液3h；可耐受濃度為0.5％(質量百分比濃度)的膽鹽20h。

丁酸梭菌(Clostridium?butyricum)B1?CGMCC?No.4845對氨芐青霉素、硫酸鏈霉素、紅霉素和氯霉素敏感，對慶大霉素和卡那霉素耐受能力較強。

急性毒性試驗結果表明小鼠對丁酸梭菌(Clostridium?butyricum)B1?CGMCCNo.4845的最大耐受劑量MTD＞15000mg/kg，根據分級標準，該菌株為無毒物質。

本發明的第二個目的是提供一種丁酸梭菌(Clostridium?butyricum)B1?CGMCCNo.4845在飼料中應用的微生態制劑。

本發明所提供的微生態制劑，其活性成分為丁酸梭菌(Clostridium?butyricum)B1?CGMCC?No.4845。

所述微生態制劑中還可添加有豆粕、麩皮和稻殼中一種或幾種。

本發明的另一個目的是提供一種上述微生態制劑的制備方法。