[發(fā)明專利]一種脂肽的水解方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110230542.4
• 申請(qǐng)日: 2011-08-11
• 公開（公告）號(hào): CN102276685A
• 公開（公告）日: 2011-12-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 牟伯中;楊世忠;劉金峰;趙越
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華東理工大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K1/12
• 分類號(hào): C07K1/12
• 代理公司: 上海科盛知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31225
• 代理人: 蔣亮珠

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及脂肽，尤其是涉及一種脂肽的水解方法。

背景技術(shù)

脂肽是由肽鏈和脂肪鏈所組成的具有生物活性物質(zhì)，脂肽在酸性、堿性、酶等條件下發(fā)生水解，水解的最終產(chǎn)物是氨基酸和脂肪酸。目前大部分行業(yè)，如化妝品，藥品和食品行業(yè)，多采用酶法水解進(jìn)行生產(chǎn)。該方法具有水解位點(diǎn)特定，反應(yīng)時(shí)間短，pH溫和等特點(diǎn)，但是酶制劑的成本偏高，對(duì)反應(yīng)環(huán)境要求嚴(yán)格，還有后續(xù)滅活等問題。現(xiàn)有技術(shù)脂肽酸水解采用的條件：6mol/L鹽酸，110℃-150℃水解，現(xiàn)有技術(shù)存在主要問題是：由于水解溫度高，脂肽的羥基脂肪酸殘基會(huì)脫水成為烯酸，導(dǎo)致副產(chǎn)物增多；工業(yè)生產(chǎn)操作困難，能耗大，反應(yīng)需要壓力容器控制，存在安全隱患。同樣，堿性水解中也存在羥基脂肪酸脫水嚴(yán)重的問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種可在保證了水解率的同時(shí)，減少副反應(yīng)的發(fā)生，提高產(chǎn)物的純度的脂肽的水解方法。

本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)：一種脂肽的水解方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：將脂肽加入酸溶液中，放置在加熱裝置中反應(yīng)20h，即得脂肽水解液。

所述的酸溶液為濃度為6.0mol/L的鹽酸溶液。

所述的加熱裝置溫度為80℃、90℃、100℃。

所述的加熱裝置溫度為90℃。

所述的脂肽與酸的質(zhì)量比為1∶(50～250)。

所述的脂肽是由肽鏈和脂肪鏈所組成的具有生物活性物質(zhì)。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明使脂肽酸性水解的溫度降低了10-30℃，減少了副產(chǎn)物、大幅度降低了能耗，解決了現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷。

附圖說明

圖1本發(fā)明技術(shù)脂肽水解樣品獲得羥基脂肪酸甲脂化產(chǎn)物的總離子色譜圖；

圖2現(xiàn)有技術(shù)脂肽水解樣品獲得羥基脂肪酸甲脂化產(chǎn)物的總離子色譜圖；

圖3本發(fā)明技術(shù)羥基脂肪酸脫水產(chǎn)生的烯酸甲酯化產(chǎn)物的質(zhì)譜圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。

實(shí)施例1：

脂肽水解

取5.0mg脂肽樣品于反應(yīng)瓶中，加入1.0mL?6.0mol/L鹽酸溶液使之溶解，分別放置在80℃、90℃、100℃和110℃的烘箱中反應(yīng)20h。反應(yīng)完畢，用甲醇全部轉(zhuǎn)移至25mL比色管。加入4倍體積的去離子水，混勻后，用乙醚萃取三次，收集有機(jī)層并用水洗滌，常溫常壓干燥除去溶劑和水分。干燥后，加入1.0mol/LH₂SO₄/CH₃OH(1/10，v/v)，55℃下酯化6小時(shí)。用乙醚萃取三次，收集有機(jī)層并用水洗滌，常溫常壓干燥除去溶劑和水分，待測(cè)GC-MS。使用Agilent的氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(6890GC，5975MSD)，使用HP-5MS色譜柱(30m×0.25mm×0.25μm，Agilent)進(jìn)行檢測(cè)。本發(fā)明技術(shù)90℃和現(xiàn)有技術(shù)110℃條件下水解得到的色譜圖結(jié)果分別如圖1和圖2所示。

圖1-2中分別標(biāo)示了6個(gè)β-羥基脂肪酸酯和4個(gè)脫水烯酸酯，這4個(gè)峰的質(zhì)譜圖如圖3所示。對(duì)羥基脂肪酸酯和烯酸酯的色譜峰進(jìn)行積分，以峰面積進(jìn)行計(jì)算，定義如下公式：

烯酸峰面積總量(U)＝烯酸峰面積總和(Un-iso?C₁₄+Un-n?C₁₄+Un-iso?C₁₅+Un-anti?C₁₅)

羥基脂肪酸峰面積總量(H)＝羥基脂肪酸峰面積總和(iso?C₁₃+anti?C₁₃+iso?C₁₄+n?C₁₄+iso?C₁₅+anti?C₁₅)

注：公式中Un-iso?C₁₄為脫水異構(gòu)十四碳羥基脂肪酸；Un-n?C₁₄為脫水正構(gòu)十四碳羥基脂肪酸，Un-iso?C₁₅為脫水異構(gòu)十五碳羥基脂肪酸；Un-anti?C₁₅為脫水反異構(gòu)十五碳羥基脂肪酸。