[發(fā)明專利]紫紅紅球菌及其催化亞氨基二乙腈制備亞氨基二乙酸有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201110223776.6 | 申請(qǐng)日： | 2009-07-16 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN102286409A | 公開(kāi)（公告）日： | 2011-12-21 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 鄭裕國(guó);柳志強(qiáng);張濤;徐建妙;薛亞平;鄭仁朝;沈寅初 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 浙江工業(yè)大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12N1/20 | 分類號(hào)： | C12N1/20;C12P13/04;C12R1/01 |
| 代理公司： | 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201 | 代理人： | 黃美娟;冷紅梅 |
| 地址： | 310014 *** | 國(guó)省代碼： | 浙江;33 |
| 權(quán)利要求書(shū)： | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū)： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 紫紅 球菌 及其 催化 氨基 二乙腈 制備 乙酸 | ||
1.紫紅紅球菌(Rhodococcus?rhodochrous)ZJB09125，保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，地址：中國(guó).武漢.武漢大學(xué)，430072，保藏編號(hào)CCTCC?No：M?209047，保藏日期2009年3月18日。
2.一種利用權(quán)利要求1所述紫紅紅球菌CCTCC?No：M?209047催化亞氨基二乙腈制備亞氨基二乙酸的方法，所述方法如下：
(A)將所述紫紅紅球菌CCTCC?No：M?209047接種至產(chǎn)酶培養(yǎng)基，加入誘導(dǎo)劑a于100～200r/min、20～35℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)2～5d；所述誘導(dǎo)劑a為正丁腈、異丁腈或己內(nèi)酰胺；所述產(chǎn)酶培養(yǎng)基終濃度組成為：甘油8g/L，酵母膏6g/L，NaCl?1g/L，K2HPO4?5g/L，MgSO4?0.2g/L，溶劑為水，pH值7.0；所述誘導(dǎo)劑a的終濃度為5g/L；
(B)取亞氨基二乙腈配制成質(zhì)量濃度0.5％～6％的水溶液，調(diào)初始pH為7.0～7.5，作為酶催化反應(yīng)底物溶液；以步驟(A)發(fā)酵獲得的濕菌體、細(xì)胞破碎獲得的粗酶液或經(jīng)固定化得到的固定化細(xì)胞作為酶源，酶源加入量以濕菌體計(jì)為0.1～10g濕菌體/10mL底物溶液；控制反應(yīng)溫度為30℃、反應(yīng)pH為6.0～9.0，進(jìn)行轉(zhuǎn)化反應(yīng)8～16h，反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液經(jīng)分離純化得到亞氨基二乙酸。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述的步驟(B)取亞氨基二乙腈配制成質(zhì)量濃度0.5％～6％的水溶液，以氨水、NaOH或HCl水溶液調(diào)pH為7.0～7.5。
4.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述的步驟(A)所述的發(fā)酵培養(yǎng)在30℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)3d。
5.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述的步驟(B)所述的控制反應(yīng)溫度為30℃，進(jìn)行轉(zhuǎn)化反應(yīng)10h。
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