[發明專利]人顱內生殖細胞腫瘤標志物基因HESRG的應用方法

無效

• 申請號: 201110222717.7
• 申請日: 2011-08-04
• 公開（公告）號: CN102277431A
• 公開（公告）日: 2011-12-14
• 發明（設計）人: 任彩萍;黃偉;蔣星軍;王茍思義;馮湘玲;劉衛東
• 申請（專利權）人: 中南大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N33/574;A61K39/395;A61P35/00
• 代理公司: 長沙市融智專利事務所 43114
• 代理人: 袁靖

技術領域

本發明屬于基因工程領域，涉及人胚胎干細胞相關基因(HESRG)的新的應用方法。

背景技術

顱內生殖細胞腫瘤是遠東地區(包括中國、日本)青壯年高發的一類惡性腫瘤，嚴重威脅著人民的生命安全。顱內生殖細胞腫瘤是由于在胚胎發育過程中，原始生殖細胞在遷移過程中受到某種因素的影響而遷移到了中樞神經系統的部位，從而導致了顱內生殖細胞腫瘤的發生。世界衛生組織(WHO)根據其病理特點將其分為：生殖細胞瘤，絨(毛)膜癌，卵黃囊瘤，胚胎癌及畸胎瘤五種。目前顱內生殖細胞腫瘤分子診斷的標志物主要有AFP(甲胎球蛋白)、HCG(人絨毛膜促性腺激素)、HPL(胎生乳素)、PLAP(人胎盤堿性磷酸酶)、c-Kit、OCT4、Cytokeratin(細胞角質蛋白)、Nanog等。雖然這些指標的單獨或者聯合應用為顱內生殖細胞腫瘤的診斷提供了有用的信息，但它們均缺乏足夠的靈敏度和特異性：例如AFP是人類認識較早的、較有價值的肝癌和生殖細胞瘤腫瘤標志物，AFP在顱內生殖細胞腫瘤中主要表達在卵黃囊瘤、部分畸胎瘤及部分胚胎癌中，但同時其在消化道腫瘤(如胃癌、胰腺癌、結腸癌、膽管細胞癌等)中也具有較強表達，缺乏足夠的特異性；HCG主要是妊娠期滋養層腫瘤和生殖細胞腫瘤的標志物，顱內生殖細胞腫瘤中主要在絨毛膜癌、部分生殖細胞瘤及部分胚胎癌中表達，同時其在乳腺癌、肺癌、胃腸道腫瘤等非妊娠期滋養層腫瘤和生殖細胞腫瘤中也有異常表達；HPL、PLAP、c-Kit、OCT4、Cytokeratin、Nanog等標志物均在多種生殖細胞腫瘤中表達或只在某類生殖細胞腫瘤中部分表達，且在其他非生殖細胞腫瘤中也有表達，均缺乏足夠的特異性。而將上述各類標志物聯合進行診斷時，由于各種標志物的表達存在較多重疊而缺乏較好的互補也很難達到理想的結果。

人胚胎干細胞相關基因(Human?embryonic?stem?cell?related?gene，HESRG)是我們利用芯片篩選、電子克隆、RACE等方法在人胚胎干(ES)細胞中克隆和命名的一個人類新基因(Zhao?M，Ren?C(通訊作者)，Yang?H，Feng?X，Jiang?X，Zhu?B，Zhou?W，?Wang?L，Zeng?Y，Yao?K.Transcriptional?profiling?of?human?embryonic?stem?cells?and?embryoid?bodies?identifies?HESRG，?a?novel?stem?cell?gene.?Biochem?Biophys?Res?Commun，2007，362(4)：916-922(IF2006＝2.855))，該基因在人ES細胞中高表達而在正常胎兒組織、成人睪丸組織、多種腫瘤(不包含生殖細胞腫瘤)和正常細胞系中均不表達，說明HESRG基因的表達具有特異性。由于ES細胞及原始生殖細胞都是多能性細胞；且克隆該基因過程中，發現EST序列BF223023來源于生殖細胞腫瘤，因此我們通過RT-PCR、Real-time?PCR以及免疫組化等方法檢測了其在中樞神經系統腫瘤內的表達情況，發現HESRG基因特異性表達于顱內生殖細胞瘤及胚胎癌中(表達陽性率達100％)，而在其他顱內的生殖細胞腫瘤及非生殖細胞腫瘤均不表達，說明HESRG是一種新型的特異性顱內生殖細胞瘤及胚胎癌的腫瘤標志物。與上述各種標志物相比，檢測HESRG的表達對于診斷顱內生殖細胞瘤及胚胎癌具有更高的靈敏度、準確度和特異性，同時HESRG與AFP、HCG等上述標志物的表達具有較好的互補性，利用HESRG與上述一種或者兩種標志物進行聯合診斷，可以準確地診斷各種類型的生殖細胞腫瘤。因此，HESRG作為顱內生殖細胞腫瘤的特異性標志物在臨床診斷上擁有巨大的應用價值。

發明內容

本發明的目的在于提供一種人顱內生殖細胞腫瘤(胚胎癌和生殖細胞瘤)標志物HESRG基因在制備診斷和治療顱內生殖細胞腫瘤的產品上的應用方法。

人顱內生殖細胞腫瘤標志物基因HESRG用于制備診斷和治療人顱內生殖細胞腫瘤的產品；特別是用于制備診斷人顱內生殖細胞腫瘤的產品。

所述的產品包括用RT-PCR、Real-time?PCR、免疫檢測、原位雜交或基因芯片等方式診斷人顱內生殖細胞腫瘤的產品。

所述的用RT-PCR診斷人顱內生殖細胞腫瘤的產品至少包括一對特異擴增引物。

所述的用Real-time?PCR診斷人顱內生殖細胞腫瘤的產品至少包括一對特異擴增引物。

所述的用免疫檢測診斷人顱內生殖細胞腫瘤的產品包括與HESRG基因編碼蛋白結合的抗體。