[發明專利]一種低場高弛豫率MRI造影劑及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201110221384.6
• 申請日: 2011-08-03
• 公開（公告）號: CN102319443A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發明（設計）人: 舒春英;甄明明;王春儒;鄭俊鵬
• 申請（專利權）人: 中國科學院化學研究所
• 主分類號: A61K49/06
• 分類號: A61K49/06
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明涉及一種低場高弛豫率MRI造影劑及其制備方法與應用。

背景技術

磁共振成像(Magnetic?Resonance?Imaging，MRI)技術是80年代以來醫學影像學發展的最新成就之一，是一種無損的、高分辨影像學檢查方法。它不僅可以在不使用有害的射線條件下提供軟組織高分辨率(50μm)的三維圖像，而且還可以同時給出病灶生理學和解剖學的實時信息，是診斷腫瘤、指導外科手術最為有效的方法之一[Lauffer?R.B.，Chem.Rev.[J]，1987，87(5)：p.901-927.]。盡管常規MRI本身就具有優良的軟組織對比度，但是，當病變組織具有類似正常組織的T₁和T₂值時，正常和病變組織之間不能產生明顯對比度。此時，即使通過MR序列設計也很難分辨出它們之間的信號差別，MRI常規掃描會漏掉病變，造成病變診斷的誤診或漏診。為了增強病變組織與正常組織圖像之間的對比度和清晰度，需要選擇合適的造影增強劑來顯示解剖學特征。這些造影增強劑絕大多數是利用金屬離子的順磁特性。具有7個未成對電子的金屬離子釓、具有5個未成對電子的金屬離子鐵和錳是設計金屬對比度增強劑最理想的選擇。1987年Gd-DTPA作為MRI對比劑正式被美國食品和藥物管理局(FDA)批準，并被大量藥理和臨床應用研究證明是一種安全、方便、增強效果良好的對比劑，也是目前臨床最常用以及應用最為廣泛的MRI造影劑。然而傳統的MRI造影劑仍然存在效率低、靶向性差等缺點。

現代醫學的迅速發展對疾病的診療提出更高的要求，期望分子影像探針在對病灶或目標部位進行顯像的同時，還能作為藥物對疾病進行原位治療。所以，人們開始積極研究雙模態或者多模態分子探針，希望能綜合兩種或多種模態探針的優點，使分子探針在診斷、治療和監測等方面可獲得一些全新的信息。

發明內容

本發明的目的是提供一種低場高效MRI大分子造影劑及其制備方法。

本發明所提供的MRI大分子造影劑是以小分子MRI造影劑Gd-DTPA作為母體，制備以人血清白蛋白(HSA)為載體的大分子造影劑前驅體，再將其與富勒烯羧酸衍生物C₆₀[C(COOH)₂]_x(x＝2-4)偶聯，得到適用于低場的高效MRI大分子造影劑Gd-DTPA-HSA-{C₆₀[C(COOH)₂]_x}。

所述MRI造影劑的制備方法，具體包括下述步驟：

a)將富勒烯羧酸衍生物溶于MES(2-(N-嗎啉基)乙磺酸)緩沖液中，加入EDC·HCl(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽)和NHS(N-羥基琥珀酰亞胺)，室溫下反應，得到富勒烯羧酸活性酯溶液；

b)將Gd-DTPA-HSA加入到所述富勒烯羧酸活性酯溶液中攪拌反應，即得到所述的MRI造影劑。

其中，步驟a)中所述MES緩沖液的pH值為4.7-6.0；所述富勒烯羧酸衍生物在所述MES緩沖液中的濃度為1mg/mL。

所述富勒烯羧酸衍生物、EDC·HCl、NHS的摩爾比1∶6∶6；所述反應的反應時間為2-4小時。

所述方法還包括：將步驟b)得到的MRI造影劑使用Mw＝12,000-14,000透析袋透析除去小分子，之后使用Mw＝10,000的超濾離心管除去未反應的富勒烯分子，通過測定濾液的紫外可見吸收進行監控直至完全除去富勒烯羧酸衍生物。

本發明中所述Gd-DTPA-HSA是按照下述方法制備得到的：

1)將100-200mg?HSA溶于5mL?PBS(pH?7.4)緩沖液中，直接分批加入cDTPA雙酐(二乙烯三胺五乙酸環酐)固體，使用0.1M?NaOH溶液調節pH在7左右，室溫下反應2h；

2)反應后通過葡聚糖凝膠Sephadex?G-25(PD-10目)進行分離純化，洗脫液：0.5M?CH₃COONa(pH＝6.0)，使用紫外可見分光光度計進行監控；

3)將100-200mg?GdCl₃·6H₂O溶于1mL?CH₃COONa(pH＝6.0)緩沖溶液加入到HSA-DTPA溶液中，室溫下攪拌2h，使用Mw＝12,000-14,000透析袋透析除去小分子，之后使用Mw＝10,000的超濾離心管除去未反應的物質，通過測定溶液的電導率進行監控直至完全除去Gd³⁺。