[發明專利]基于指紋圖譜的水產品摻假檢測方法及系統

無效

• 申請號: 201110220001.3
• 申請日: 2011-08-02
• 公開（公告）號: CN102321739A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發明（設計）人: 張小栓;張佳;張健;劉峰;齊林;邢少華
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12M1/34;G06F19/22
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王瑩

技術領域

本發明涉及食品檢測技術領域，特別涉及一種基于指紋圖譜的水產品摻假檢測方法及系統。

背景技術

我國是水產大國，漁業產量已多年位居世界第一位，水產品的出口也是世界第一位。但是我國在水產品的生產加工中也存在著很多問題，由于水產品加工企業的疏忽甚至是故意行為導致的水產品摻假問題，威脅著消費者的生命安全。

目前，中國食品的可追溯制度更多是建立在企業和行業誠信基礎上，由生產者確保其標示內容的真實。但是越來越多的摻假事件證明單純依靠企業或行業自律是遠遠達不到確保水產品質量安全的目的，這一系列事件的發生使得可追溯系統的的誠信度也受到質疑。因此需要引入一些有效的檢測方法，對水產品摻假進行檢測，作為可追溯系統的輔助，確保可追溯信息的真實性。

現在的一些摻假手段往往比較隱蔽，用傳統的檢測手段很難檢測出來；另外在一些經過深加工的食品中原材料已經嚴重變性無法用常規方法鑒別。因此基于現代分子技術的指紋圖譜技術正被越來越多的應用于食品的檢測中，指紋圖譜是指樣品經適當處理后，采用一定的分析手段，得到能夠標示該樣品特性的譜圖或圖像。這些圖譜或圖像就如人的指紋一樣具有專一性和代表性，因此被形象地稱之為指紋圖譜。指紋圖譜技術按照所用方法不同可分為電泳指紋圖譜、波譜指紋圖譜和色譜指紋圖譜，這些方法原來應用于物質結構分析或遺傳分析，有著極高的分辨率、準確度和靈敏度。

由于指紋圖譜抽象程度比較高，比較復雜，因此，傳統應用中指紋圖譜的識別和判斷需要檢測人員豐富的實踐經驗；又由于個體操作的差異性使得同一物種的指紋圖譜也出現不同程度的差異。這些困難和差異使指紋圖譜檢測技術，在傳統的物質結構分析或遺傳分析之外的推廣受到限制。

發明內容

(一)要解決的技術問題

本發明要解決的技術問題是：如何提供一種基于指紋圖譜的水產品摻假檢測方法及系統，從而實現對水產品摻假的自動檢測，克服對檢測人員的經驗要求過高的問題。

(二)技術方案

為解決上述技術問題，本發明提供一種基于指紋圖譜的水產品摻假檢測方法，其包括步驟：

A：根據水產品標準樣品的DNA建立標準指紋圖譜；

B：對所述標準指紋圖譜進行處理，得到對應所述標準指紋圖譜的標準一維波形圖；

C：根據水產品待測樣品的DNA建立待測指紋圖譜；

D：對所述待測指紋圖譜進行處理，得到對應所述待測指紋圖譜的待測一維波形圖；

E：根據所述標準一維波形圖和所述待測一維波形圖，對所述標準指紋圖譜和所述待測指紋圖譜進行相似度對比，根據對比結果判斷所述待測樣品是否摻假。

優選地，所述步驟A具體包括步驟：

A1：提取水產品標準樣品的DNA；

A2：以所述標準樣品的DNA做為目的DNA進行PCR擴增，得到標準PCR產物；

A3：對所述標準PCR產物進行限制性酶切，對酶切結果進行電泳分析，得到標準指紋圖譜。

優選地，所述水產品標準樣品包括：鳙魚、青魚、鯉魚、草魚、鰱魚、羅非魚或鯽魚。

優選地，所述步驟A2中采用兩對引物進行PCR擴增，所述兩對引物中，第一對為D6200-F和D6200-R，第二對為D14800-F和D14800-R。

優選地，所述步驟A3中，采用6種酶進行限制性酶切，所述6種酶分別是：Sac?I，Bgl?II，BstX?I，Stu?I，Ssp?I和Bln?I。

優選地，所述步驟B具體包括步驟：

B1：對所述標準指紋圖譜進行降噪處理；

B2：對降噪處理后的所述標準指紋圖譜進行灰度轉化，得到標準灰度圖像；

B3：對所述標準灰度圖像進行銳化處理；

B4：對銳化處理的所述標準灰度圖像進行泳道識別處理；

B5：對泳道識別處理后的所述標準灰度圖像進行條帶分析，得到對應所述標準指紋圖譜的標準一維波形圖。

優選地，所述步驟E具體包括步驟：

E1：根據所述標準一維波形圖和所述待測一維波形圖，采用Nei系數法計算所述待測指紋圖譜和每個標準指紋圖譜的相似度f；

E2：比較對應每個標準指紋圖譜的相似度f，找到相似度f的值最大的標準指紋圖譜，做為結果指紋圖譜；

E3：判斷所述結果指紋圖譜對應的標準樣品與所述待測樣品所標識的原料是否一致，如果一致，所述待測樣品未摻假，否則所述待測樣品摻假了。

優選地，所述步驟E1中，所述相似度f的計算公式如下：