[發(fā)明專利]一種CYP2B6基因多態(tài)性檢測特異性引物和液相芯片

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110219244.5
• 申請日: 2011-08-02
• 公開（公告）號: CN102912007A
• 公開（公告）日: 2013-02-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 許嘉森;郭靖
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州益善生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 廣州華進聯(lián)合專利商標(biāo)代理有限公司 44224
• 代理人: 萬志香;曾旻輝

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于分子生物學(xué)領(lǐng)域，涉及醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)，具體的是涉及一種CYP2B6基因多態(tài)性檢測特異性引物和液相芯片。

背景技術(shù)

CYP2B6是CYP家族中重要的藥物代謝酶，廣泛分布于人體肝臟、腎臟、肺、小腸、子宮內(nèi)膜、支氣管肺泡的巨噬細(xì)胞，外周血淋巴細(xì)胞和腦部等，參與多種內(nèi)源性和外源性物質(zhì)的合成和代謝。CYP2B6基因定位在19q12～13.2，全長28kb，由8個內(nèi)含子將9個外顯子分隔開來，編碼的蛋白質(zhì)由491個氨基酸組成，相對分子質(zhì)量為58268。有研究表明，CYP2B6蛋白表達水平不僅在種族之間，而且在不同性別之間存在著差異，個體差異超過250倍，甚至某些人的表達無法檢測到。造成CYP2B6表達個體差異的主要因素是遺傳和環(huán)境，已知CYP2B6能被多種藥物抑制和誘導(dǎo)，此外，眾多的基因多態(tài)性也已被發(fā)現(xiàn)，種族、性別、年齡等因素對CYP2B6表達和活性都有影響。

本發(fā)明目標(biāo)檢測的CYP2B6基因突變位點(多態(tài)性位點)，如表所示：

??序號??CYP2B6位點突變的內(nèi)容?簡寫??1??SEQ?ID?NO.55的第123位核苷酸，發(fā)生C→T突變?C123T??2??SEQ?ID?NO.56的第101位核苷酸，發(fā)生A→G突變?A101G??3??SEQ?ID?NO.57的第118位核苷酸，發(fā)生G→T突變?G118T??4??SEQ?ID?NO.58的第77位核苷酸，發(fā)生A→G突變?A77G??5??SEQ?ID?NO.59的第139位核苷酸，發(fā)生T→C突變?T139C??6??SEQ?ID?NO.59的第288位核苷酸，發(fā)生C→T突變?C288T

目前，對CYP2B6基因多態(tài)性進行檢測、分析的方法主要有：直接測序法和PCR-RFLP分析法等，其中最常用的方法有PCR-RFLP分析法。PCR-RFLP法是基于基因突變造成的限制性內(nèi)切酶識別位點的改變，如位點丟失或產(chǎn)生新位點，通過PCR擴增某一特定片段，再用限制性內(nèi)切酶酶切擴增產(chǎn)物，電泳觀察片段的大小，這種方法用于檢測酶切位點改變的基因突變，可直接判斷基因型，但該法不能用于沒有產(chǎn)生新酶切位點的基因突變檢測。再次，以上這些方法都存在著檢測通量的局限性，每次只能檢測一種突變類型，不能滿足實際應(yīng)用的需要。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的之一是提供CYP2B6基因多態(tài)性檢測液相芯片，該液相芯片可用于檢測CYP2B6基因六種常見基因型C123T、A101G、G118T、A77G、T139C和C288T的野生型和突變型。

實現(xiàn)上述目的的技術(shù)方案如下：