[發明專利]一種ABCB1基因多態性檢測特異性引物和液相芯片

無效

• 申請號: 201110219034.6
• 申請日: 2011-08-02
• 公開（公告）號: CN102912003A
• 公開（公告）日: 2013-02-06
• 發明（設計）人: 許嘉森;劉志明
• 申請（專利權）人: 廣州益善生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 萬志香;曾旻輝

技術領域

本發明屬于分子生物學領域，涉及醫學和生物技術，具體的是涉及一種ABCB1基因多態性檢測特異性引物和液相芯片。

背景技術

腫瘤多藥耐藥存在多種機制，其中以ABC轉運蛋白超家族(ATP-binding?cassette?transporter?superfamily)成員介導的細胞內藥物外排在MDR中起了重要作用，也是目前國內外研究的熱點之一。

多藥耐藥基因ABCB1(multidrug?resistance?1，或稱MDR1)又名多藥耐藥相關蛋白(multidrug?resistance?protein，MRP1)，是P-糖蛋白(P-glycol?protein，P-gp)的編碼基因。多藥耐藥基因MDR1的表達產物P-糖蛋白是一種ATP依賴型膜轉運蛋白，它可以將藥物及許多其他相關分子從細胞內排出，參與許多正常的生理活動。

藥物基因組學研究發現，在不同種族和個體間ABCB1基因多態性與P-gp表達和功能的改變密切相關，其中26號、21號和12號外顯子的單核苷酸多態性(SNPs)最引人注目，這些SNPs改變可直接影響藥物在細胞內的有效濃度，ABCB1基因在許多腫瘤細胞中均呈高表達，是導致腫瘤細胞對藥物產生耐受的重要因素之一。

目前，對ABCB1基因多態性進行檢測、分析的方法很多，如：直接測序法、Real?time-PCR、PCR-RFLP分析法等等，其中最常用的方法有PCR-RFLP分析法。PCR-RFLP法是基于基因突變造成的限制性內切酶識別位點的改變，如位點丟失或產生新位點，通過PCR擴增某一特定片段，再用限制性內切酶酶切擴增產物，電泳觀察片段的大小，這種方法用于檢測酶切位點改變的基因突變，可直接判斷基因型，但該法不能用于沒有產生新酶切位點的基因突變檢測。再次，以上這些方法都存在著檢測通量的局限性，每次只能檢測一種突變類型，不能滿足實際應用的需要。

本發明目標檢測的ABCB1基因突變位點，如表所示：

表1ABCB1位點突變(多態性)的內容

??序號??ABCB1位點突變的內容??簡寫??1??SEQ?ID?NO.34的第61位核苷酸，發生T→C突變??T61C??2??SEQ?ID?NO.35的第101位核苷酸，發生T→G/A突變??T101G/A??3??SEQ?ID?NO.36的第81位核苷酸，發生C→T突變??C81T

發明內容

本發明的目的之一是提供一種ABCB1基因多態性檢測液相芯片，該液相芯片可用于檢測ABCB1基因三種常見基因型T61C、T101G/A和C81T的野生型和突變型。

實現上述目的的技術方案如下：

一種ABCB1基因多態性檢測液相芯片，包括有：