[發明專利]一種含HIPK2基因的重組質粒用于制備抗腫瘤藥物的用途

無效

• 申請號: 201110217231.4
• 申請日: 2011-08-01
• 公開（公告）號: CN102335438A
• 公開（公告）日: 2012-02-01
• 發明（設計）人: 李琦;范忠澤;周利紅;王炎;慈書俊;李克桑;秦建民;陳星竹
• 申請（專利權）人: 上海中醫藥大學附屬普陀醫院;上海市普陀區中心醫院
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;C12N15/85;A61K35/00
• 代理公司: 上海信好專利代理事務所(普通合伙) 31249
• 代理人: 賈慧琴;姜玉芳

1.一種含HIPK2基因的重組質粒用于制備抗腫瘤藥物的用途。

2.如權利要求1所述的含HIPK2基因的重組質粒用于制備抗腫瘤藥物的用途，其特征在于，該重組質粒包含HIPK2基因的編碼序列以及載體質粒DNA序列，所述的載體質粒DNA序列中包含與HIPK2基因連接的調節序列；所述的重組質粒通過以下步驟構建：

步驟1，以含有人HIPK2基因的真核表達載體pENTR223.1/HIPK2為模板設計引物序列，分別引入Nhe?I和Kpn?I酶切位點；

步驟2，對HIPK2基因進行PCR擴增；

步驟3，對所得HIPK2基因序列和載體質粒進行Nhe?I和Kpn?I雙酶切以及純化；

步驟4，將步驟3所得產物進行T₄?DNA連接酶酶切，使HIPK2基因目的片段和載體質粒相連接；?

步驟5，用步驟4所得連接產物轉化大腸桿菌感受態細胞；

步驟6，將步驟5所得重組質粒進行酶切鑒定陽性克隆并測序。

3.如權利要求1或2所述的含HIPK2基因的重組質粒用于制備抗腫瘤藥物的用途，其特征在于，該重組質粒的應用包含以下步驟：

步驟1），HIPK2基因重組質粒轉染人腫瘤細胞；

步驟2），HIPK2基因重組質粒在人腫瘤細胞中功能活性的鑒定；

步驟3），通過體外實驗研究HIPK2基因重組質粒在人腫瘤細胞血管新生、增殖凋亡、侵襲轉移中的作用；

步驟4）開發基于HIPK2基因的抗腫瘤藥物。

4.4．如權利要求3所述的含HIPK2基因的重組質粒用于制備抗腫瘤藥物的用途，其特征在于，所述的HIPK2基因重組質粒轉染的人腫瘤細胞，包含所有瞬時和穩定轉染HIPK2基因重組質粒的人腫瘤細胞。

5.如權利要求4所述的含HIPK2基因的重組質粒用于制備抗腫瘤藥物的用途，其特征在于，所述的HIPK2基因重組質粒轉染的人腫瘤細胞，包含肝癌、胃癌、結直腸癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌和肺癌癌細胞。

6.如權利要求5所述的含HIPK2基因的重組質粒用于制備抗腫瘤藥物的用途，其特征在于，所述的HIPK2基因重組質粒轉染的人腫瘤細胞，是指消化系惡性腫瘤細胞。

7.如權利要求3所述的含HIPK2基因的重組質粒用于制備抗腫瘤藥物的用途，其特征在于，步驟4）中所述的基于HIPK2基因的抗腫瘤藥物，其制劑形式包含注射液、噴涂劑、凍干劑。

8.如權利要求3所述的含HIPK2基因的重組質粒用于制備抗腫瘤藥物的用途，其特征在于，步驟4）中所述的基于HIPK2基因的抗腫瘤藥物，其給藥途徑包含靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、介入給藥和直接瘤內注射。