[發明專利]用于檢測I型糖尿病特征蛋白的質譜模型及構建方法

有效

• 申請號: 201110216975.4
• 申請日: 2011-07-29
• 公開（公告）號: CN102323365A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發明（設計）人: 馬慶偉;殷汝雷;胡曉慧;任晶
• 申請（專利權）人: 毅新興業（北京）科技有限公司
• 主分類號: G01N30/72
• 分類號: G01N30/72;G01N30/06
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 張慶敏

技術領域

本發明涉及糖尿病檢測領域，為一種全新的非入侵性檢測方法，在體外對糖尿病，特別是I型糖尿病進行的發現和檢測，其敏感性和特異性均達到以上。

背景技術

糖尿病是由于胰島素不足而引起的代謝性疾病。基本特征是長期高血糖。胰島素是由胰腺中β細胞分泌的，是葡萄糖代謝中不可缺少的一種激素。當胰島素分泌不足，葡萄糖利用及貯存受阻，血液中葡萄糖濃度(血糖濃度)就會升高。血糖濃度超過一定水平，多余的葡萄糖便通過腎臟排出體外，這時化驗小便會發現尿糖陽性，故稱糖尿病。糖尿病分原發性和繼發性兩大類。原發性糖尿病是指其發病原因尚未明確，也稱特發性糖尿病或原因不明性糖尿病，占絕大多數。一般所稱糖尿病即指原發性糖尿病。可分以下幾型：

1胰島素依賴型糖尿病(IDDM，I型)

該型約占糖尿病總數的5％-10％，發病年齡多小于40歲，主要為幼年及青少年，偶見于非肥胖的成人。患者體內胰島素極少或缺乏，發病時糖尿病癥狀較明顯，病情較重，有酮癥傾向(指易發生糖尿病酮癥酸中毒)必須依賴外源性胰島素為生，一旦中止胰島素治療則會威脅生命。

2非胰島素依賴型糖尿病(NIDDM，II型)

該型約占糖尿病總數的90％或以上，多于40歲后發病，起病緩慢、隱匿，臨床癥狀不典型，病情較輕，有些病人是因動脈硬化、冠心病、腎臟疾病或眼科疾病就診而發現糖尿病，有些是在健康檢查時才發現患有糖尿病。該型糖尿病一般無酮癥傾向，控制飲食或加用口服降糖藥治療便能控制病情，少數病人為控制血糖必須用胰島素治療，但不依賴外源性胰島素(即停用胰島素不致于威脅病人生命)。

目前我國糖尿病及糖耐量低減的患病率分別為2.51％和3.27％，糖尿病患病率最高地區為新疆自治區克拉瑪依市(4.6％)，其次是北京地區(3.99％)，浙江省糖尿病患病率為2.96％。雖然中國糖尿病患病率與世界發達國家相比仍然較低，但是中國人口眾多，估計現有25-64歲的糖尿病人約1500萬。另一觀察發現，大于25歲的成年人糖尿病的發病率超過130/10萬，推算在大于25歲的人口中，每年將有70萬糖尿病新病人，調查還發現，糖尿病患病率隨著年齡、體重還發現，糖尿病患病率隨著年齡、體重及平均收入的增加而增加，肥胖者患病率約為正常體重者的5倍。尿病對患者生活質量和健康的嚴重影響，以及控制糖尿病所付出的代價體現在以下幾個方面：死亡率增加2-3倍；患心臟病及中風幾率增加2-3倍；失明者比正常人多10倍；壞疽和截肢者比正常人多20倍。引發致命腎臟病的主要原因。現在國內外還沒有基于血清多肽的糖尿病診斷方法，我們應用基于質譜的蛋白質組學技術提供一種可用于診斷的方法。

基質輔助激光解析電離飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)是近年來發展起來的一種新型的軟電離生物質譜，其原理是用激光照射樣品與基質形成的共結晶薄膜，基質從激光中吸收能量傳遞給生物分子，而電離過程中將質子轉移到生物分子或從生物分子得到質子，而使生物分子電離的過程。TOF的原理是離子在電場作用下加速飛過飛行管道，根據到達檢測器的飛行時間不同而被檢測即測定離子的質荷比(M/Z)與離子的飛行時間成正比，檢測離子。盡管MALDI-TOF的準確度高達0.1％～0.01％，遠遠高于目前常規應用的SDS電泳與高效凝膠色譜技術，但在糖尿病標志物的應用中仍然存在一些缺陷，因此國內迄今為止尚無采用MALDI-TOF-MS技術獲得檢測糖尿病血清特征蛋白的報道。

發明內容

為了解決上述問題，本發明目的在于提供一種用于檢測I型糖尿病特征蛋白的質譜模型及其制備方法。

為了實現上述目的，本發明首先提供一種用于檢測I型I型糖尿病特征蛋白的質譜標記，其包括質荷比為：7010.32、8141.47、7597.7、7645.62、3314.94、8862.88、7765.57、9062.14、7921.58、7832.64、6630.96、4643.76、9289.11、8565.22、3302.42、9429.72和1984.14m/z的峰。