[發明專利]一種山萵苣素和山萵苣苦素的制備方法

有效

• 申請號: 201110213474.0
• 申請日: 2011-07-28
• 公開（公告）號: CN102351824A
• 公開（公告）日: 2012-02-15
• 發明（設計）人: 信學雷;張堯;阿吉艾克拜爾·艾薩;楊義;巴杭
• 申請（專利權）人: 中國科學院新疆理化技術研究所
• 主分類號: C07D307/93
• 分類號: C07D307/93
• 代理公司: 烏魯木齊中科新興專利事務所 65106
• 代理人: 張莉

1.一種山萵苣素和山萵苣苦素的制備方法，其特征在于采用高速逆流色譜法從毛菊苣根的粗提物或山萵苣素或山萵苣苦素粗品中得到山萵苣素和山萵苣苦素，具體操作按下列步驟進行：

a、將毛菊苣根粉碎后，用濃度為70％-100％甲醇或乙醇進行超聲波輔助提取或浸泡或熱回流提取，提取物減壓濃縮后獲得總浸膏；

b、將總浸膏分散于水中，利用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取，經減壓蒸餾后分別得到石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位浸膏；

c、將步驟b乙酸乙酯部位浸膏用乙酸乙酯溶解后，200-300目硅膠柱層析分離，用正己烷-乙酸乙酯溶劑剃度洗脫體積比4-1∶1-3，每份收集15-20ml，將流份用薄層色譜法進行跟蹤檢查，以石油醚∶乙酸乙酯1∶5為展開劑，合并相同成分，減壓濃縮，得到山窩苣素和山窩苣苦素粗品；

d、配制五種組分的混合溶劑，將石油醚、正己烷、正庚烷或正戊烷和乙酸乙酯和甲醇或乙醇和水，分別按各組分體積比為：0-2∶1-20∶1-2∶3-20將四組分溶液分別放在分液漏斗，然后分別加入總體積15％-25％四氫呋喃，搖勻后靜置分層，待平衡后，分離上相和下相；

e、再配制五種組分的混合溶劑，將石油醚、正己烷、正庚烷或正戊烷和乙酸乙酯和甲醇或乙醇和水，按各組分體積比為：0.5-2∶2-4∶2-3∶3-5將四組分溶液分別放在分液漏斗，然后分別加入總體積5％-15％的四氫呋喃，搖勻后靜置分層，待平衡后，分離上相和下相；

f、將步驟b中的乙酸乙酯部位溶于步驟d所得的溶劑系統中，采用高速逆流色譜的方法進行分離，以上相為固定相，下相位流動相，先將固定相泵入分離柱，待分離柱充滿后，調整轉速至700-900轉/分，同時泵入流動相，流速為1.0-2.0ml/min，待平衡后，由進樣閥注入樣品，打開自外檢測器及記錄儀，檢測波長254nm，按色譜圖收集所有餾分，按色譜圖收集所有餾分，真空干燥后，經HPLC與標準樣對照確定為山萵苣苦素，將剩余部分濃縮后溶于溶解于步驟e中再次進行高速逆流色譜分離，可獲得山萵苣素；

或步驟c中獲得的山萵苣素和山萵苣苦素粗品，分別溶于步驟d和步驟e溶劑系統中進行分離，采用高速逆流色譜法，以上相為固定相，下相為流動相，先將固定相泵入分離柱，待分離柱充滿后，調整轉速至700-900轉/分，同時泵入流動相，流速為1.0-2.0ml/min，待平衡后，由進樣閥注入樣品，打開自外檢測器及記錄儀，檢測波長254nm，按色譜圖收集所有餾分，真空干燥后，可獲得純度＞97％的山萵苣素和山萵苣苦素。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于步驟a超聲萃取溫度20-40℃，常溫浸提溫度20-30℃，加熱提取溫度60-90℃，液比1∶5-30。