[發明專利]一種嗜吞噬細胞無形體抗原及含有該抗原的試劑盒

無效

• 申請號: 201110212854.2
• 申請日: 2011-07-27
• 公開（公告）號: CN102286093A
• 公開（公告）日: 2011-12-21
• 發明（設計）人: 何競;曹務春;宋曉國;楊錫琴;王國華;張賀秋;江佳富;劉瑋;詹琳;蔣寶貴
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院基礎醫學研究所;中國人民解放軍軍事醫學科學院微生物流行病研究所
• 主分類號: C07K14/705
• 分類號: C07K14/705;C12N15/12;C12N15/63;C12N1/21;C07K16/28;G01N33/53;C12R1/19
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 史雙元

技術領域

本發明屬于人粒細胞無形體病檢測技術領域，具體涉及一種嗜吞噬細胞無形體抗原及含有該抗原的試劑盒。

背景技術

人粒細胞無形體病(Human?granulocytic?anaplasmosis，HGA)是由嗜吞噬細胞無形體(Anaplasma?phagocytophilum)侵染人末梢血中性粒細胞引起，以發熱伴白細胞、血小板減少和多臟器功能損害甚至死亡為主要臨床表現的新發疾病。人粒細胞無形體病是硬蜱叮咬人體而引起的人獸共患性疾病。1994年美國報告首例人粒細胞無形體病病例(Chen?SM，Dumler?JS，Bakken?JS，et?al.Identification?of?a?granulocytotropic?Ehrlichia?species?as?the?etiologic?agent?of?human?disease.J?Clin?Microbiol，1994，32(3)：589-595.)。2006年我國在安徽省發現首例人粒細胞無形體病病例，此后通過回顧性血清學與分子生物學調查發現我國浙江、山東、河南及湖北等省份均存在HGA病例(Zhang?L，Liu?Y，Ni?D，，et?al.Nosocomial?transmission?of?human?granulocytic?anaplasmosis?in?China.JAMA，2008，300(19)：2263-2270.Zhang?S，Hai?R，Li?W，et?al.Seroprevalence?of?human?granulocytotropic?anaplasmosis?in?central?and?southeastern?China.Am?J?Trop?Med?Hyg，2009，81(2)：293-295.Zhang?L，Shan?A，Mathew?B，et?al.Rickettsial?Seroepidemiology?among?farm?workers，Tianjin，People′s?Republic?of?China.Emerg?Infect?Dis，2008，14(6)：938-940.Chahan?B，Jian?Z，Xuan?X，，et?al.Serological?evidence?of?infection?of?Anaplasma?and?Ehrlichia?in?domestic?animals?in?Xinjiang?Uygur?Autonomous?Region?area，China.Vet?Parasitol，2005，134(3-4)：273-278.)。由于該病為新發疾病，相關的研究稍顯薄弱，一旦疾病爆發可能由于技術儲備不足而導致診斷不明，貽誤治療甚至引起恐慌。

目前實驗室檢測主要有包括血清及病原學檢測：(1)急性期血清間接免疫熒光抗體(IFA)檢測嗜吞噬細胞無形體IgM抗體陽性。(2)急性期血清IFA檢測嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽性。(3)恢復期血清IFA檢測嗜吞噬細胞無形體IgG抗體滴度較急性期有4倍及以上升高。(4)全血或血細胞標本PCR檢測嗜吞噬細胞無形體特異性核酸陽性，且序列分析證實與嗜吞噬細胞無形體的同源性達99％以上。(5)分離到病原體。

由于人粒細胞無形體病無特異性臨床表現，早期診斷較困難。病原學檢測包括PCR檢測嗜吞噬細胞無形體特異性核酸陽性以及分離病原體。其中PCR檢測不適宜基層醫院使用，其檢測的陽性率也偏低；病原體的分離更需一定的設備和技術儲備，不易成功。目前我國血清學檢測使用的免疫熒光試劑主要依賴美國進口，價格非常昂貴，而且制備熒光片需大量培養嗜吞噬細胞無形體，熒光片的制備很難標準化和產業化，因此利用免疫熒光方法進行大規模的樣品檢測受到限制，再者，由于熒光片制備采用感染的全細胞易產生交叉反應性，影響檢測的特異性。

由于人粒細胞無形體病是硬蜱叮咬人體而引起的，因此開展蜱傳播疾病的鑒別診斷顯得尤為重要。嗜吞噬細胞無形體的早期診斷對控制其傳播具有重要意義，而特異性抗原則是實驗室診斷優劣的關鍵所在。目前開展嗜吞噬細胞無形體的研究力量嚴重不足，尚缺乏高靈敏度、高特異性的血清檢測試劑。