[發明專利]一種苦馬豆素的制備方法

無效

• 申請號: 201110210609.8
• 申請日: 2011-07-26
• 公開（公告）號: CN102329316A
• 公開（公告）日: 2012-01-25
• 發明（設計）人: 李法慶;劉東鋒
• 申請（專利權）人: 蘇州寶澤堂醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07D471/04
• 分類號: C07D471/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于天然產物分離領域，特別是涉及一種苦馬豆素的制備方法。

背景技術

苦馬豆素是一種吲哚類生物堿，化學名是1，2，8—三羥基八氫吲哚茲啶，高純度苦馬豆素為白色針狀結晶，熔點144℃-145℃，分子式C₈H₁₅NO₃，分子量173，酸解離常數7.4，易溶于水。

苦馬豆素是最初從灰苦馬豆中分離出來一種毒性成分，是導致動物中毒的瘋草的主要成分。現代醫學研究表明，苦馬豆素能激活動物腹腔吞噬細胞的細胞結合活性，從而可抑制腫瘤細胞，對治療腫瘤、感染性疾病、免疫抑制性疾病有重要意義。最新研究表明，苦馬豆素能有效逆轉致死性輻照或高劑量化療所造成的骨髓抑制。在世界范圍內，苦馬豆素作為一種新的天然抗腫瘤藥物越來越受到重視。文獻“苦馬豆素研究進展”和《陜西日報》對其做了詳細論述。

當前，苦馬豆素的來源主要有三類：一是從微生物菌絲體或發酵液中進行提取；二是化學合成；三是從植物中提取。微生物發酵和化學合成反應條件苛刻和繁瑣，很難批量生產。從植物中制備，原料是一種毒草，而且易得，是一種變廢為寶的做法。

瘋草包括棘豆屬和黃芪屬兩屬有毒植物，國內外均有廣泛分布。在我國主要分布于西北、西南、華北的主要牧區。家畜采食后可引起中毒、死亡、流產等危害。

現有從植物中提取苦馬豆素方法，多采用有萃取法和硅膠柱分離。如“瘋草中苦馬豆素提取的提純工藝”（專利申請號：02114590.3）公開的方法是采用陽離子交換法提取出大極性生物堿粗品，再用堿性氯仿抽提，抽提部分經硅膠柱層析分離得到苦馬豆素粗品，最后分步升華獲得苦馬豆素純品。但是生產中會產生了很多酸、堿廢水污染嚴重，硅膠柱分離重現性差。還有?“從甘肅棘豆中分離提取苦馬豆素的工藝方法”（專利申請號：200610104918.3）該方法也是采用硅膠柱分離純化。而“一種從豆科棘豆屬或黃芪屬植物中提純苦馬豆素的工藝”（專利申請號：200810018178.3），該專利公開的方法是先超聲進行提取，再過大孔樹脂分離粗品，最后用升華的方法獲得精品。但是工藝采用水提取，也是存在污染嚴重問題。專利（專利申請號：200710017542.X）“連續柱層析法提純苦馬豆素的工藝”，該專利公開的方法是采用大孔樹脂、硅膠柱和高效液相連續柱層析，得到苦馬豆素。該方法工業操作復雜，制備量較小。

發明內容

本發明的目的是解決現有技術的不足，提供一種苦馬豆素的制備方法。

本發明目的是通過以下技術方案來實現的：

一種苦馬豆素的制備方法，其特征在于：將瘋草原料粉碎，加入甲醇浸泡提取2-3次，每次提取2-3小時，提取液進行濃縮，濃縮后加水進行分散，然后過濾，濾液加入大孔樹脂柱，收集柱通過液減壓濃縮，濃縮液加適量氨水，用二氯甲烷萃取，萃取液濃縮至小體積，以氯仿-甲醇-丁醇-水作為溶劑系統，采用高速逆流色譜分離，收集流分回收試劑，真空干燥即得產品。

所述的甲醇浸泡提取條件為：甲醇為80-90%甲醇溶液，提取溫度為45-55℃。

所述的大孔樹脂可選非極性大孔樹脂。

所述的高速逆流色譜分離條件為：溶劑系統為氯仿-甲醇-丁醇-水，比例30-25:1:17:12，上相為流動相，下相為固定相，轉速800-950r/min，流速1-4ml/min。???

本發明優點是：采用高濃度甲醇熱浸提取可以減少極性物質的溶出，有利于純化，減少廢水的產生；大孔樹脂純化，利用水溶性生物堿在大孔樹脂中不吸附的原理，吸附雜質，簡化了后續純化步驟；高速逆流色譜分離，樣品無損失，制備量大，重現性高，還不產生廢液。

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式

實施例1：

瘋草原料粉碎20目，取2kg，加入10L80%甲醇加熱到45℃保溫提取3小時，濾出液體，再加10L80%甲醇提取3小時，合并提取液濃縮至無醇，加適量的水進行分散，過濾，濾液加入HPD100大孔樹脂柱，收集柱通液，減壓濃縮，濃縮液加氨水調節pH至10，然后加入200mL二氯甲烷進行萃取，萃取2次，萃取液濃縮至小體積。取氯仿、甲醇、丁醇、水溶劑，按比例27:1:17:12混合，取上相為流動相，下相為固定相，把固定相注入高速逆流色譜儀柱內，開啟機器，調節主機轉速800r/min，流速1ml/min，注入樣品分離，收集目標成分，真空減壓干燥得白色苦馬豆素83mg，含量99.2%。