[發明專利]一種甘藍型油菜組織培養的光源控制方法

無效

• 申請號: 201110210419.6
• 申請日: 2011-07-26
• 公開（公告）號: CN102388800A
• 公開（公告）日: 2012-03-28
• 發明（設計）人: 唐燦明;李慧敏;徐志剛
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 張素卿

一、????????技術領域?

本發明涉及一種甘藍型油菜組織培養光源的控制方法，屬于生物技術領域。

二、????????背景技術?

植物培養中使用的光源一般是熒光燈、金屬鹵化物燈、高壓鈉燈和白熾燈。然而這些光源的光譜能量分布是依據人眼對光的高效需求原則設計生產的，含有很多不必要的波長，光效很低。同傳統的光源相比，近年來發光二極管（LED）作為一種可用于植物照明的新型半導體光源日益受到關注。LED的基本結構是一塊電致發光的半導體材料，置于一個有引線的架子上，四周用環氧樹脂密封，起到保護內部芯線的作用。LED波寬窄，光色純，波長種類豐富，與植物光合作用和形態建成的光譜范圍吻合。LED還具有較小的質量和體積、較長的壽命，調節其頻率和占空比可以節省能源和提高光合效率。由于這些顯著的特征，LED光源適合應用于可控環境中的植物培養或栽培，如植物組織培養、設施園藝與工廠化育苗和航天生態生保系統等。

用于植物栽培的LED光源表現以下優勢：LED光輸出半波寬窄，接近單色光，單獨使用或組合使用均可，使用LED光源可以集中特定波長的光均衡地照射作物，不僅可以調節作物開花與結實，而且還能控制株高和植物的營養成分。植物栽培上應用的LED屬于冷光源，光照系統發熱少，實現了低熱負荷，可以置于離植物很近的地方而不會把作物烤傷，光的利用率很高，可用于多層栽培立體組合系統；LED形狀極小，可以制備成多種形狀的器件，占用空間很小，安裝方便，使植物生產設施小型化；此外，其特強的耐用性也降低了運行成本。?

本方法探索了甘藍型油菜組織培養光源的控制技術的試驗，建立了完整可行的試驗方法，操作步驟簡單，試驗效果穩定、清晰。可以用于甘藍型油菜的組織培養、植株再生、基因的遺傳轉化、植株的快速繁殖等領域。在科研、檢測以及學生試驗中都能得到很好的應用。?

三、發明內容

技術問題??本發明的目的在于提供一種高效、節能、環保的光源控制技術，LED光源可以廣泛應用于甘藍型油菜組織培養、植株再生、基因的遺傳轉化、幼苗的快速擴繁等領域。

技術方案

本發明提供了一種甘藍型油菜組織培養的光源控制技術，使用藍紅比為3:1的LED混合光源最適合甘藍型油菜組培幼苗的生長，該光源可以用于甘藍型油菜組織培養幼苗培育的全過程，替代目前廣泛使用的熒光燈光源。

包括以下步驟：?

1）不定芽分化階段：切取帶有部分葉柄的約0.5厘米的子葉，先在添加0.1?mg/L?2,4-D的MS培養基中暗培養（光強0）2天；然后轉入添加0.8?mg/L?6-BA,?0.2?mg/L?NAA和1.0?mg/L?AgNO₃的MS培養基中，然后轉入藍紅比3:1的LED光源下培養15天，所有培養光強均為60μmol·m^-2·s^-1,光周期為12小時,培養溫度26±2℃；

2）不定芽增殖階段：不定芽分化階段所用光源為熒光燈；切取叢生芽轉入MS培養基中，然后轉入藍紅比3:1的LED光源下培養15天，所有培養光強均為60μmol·m^-2·s^-1,光周期為12小時,培養溫度26±2℃；

3）幼苗光質處理階段:不定芽分化和增殖階段所用的光源都為熒光燈；切取一葉一心的幼苗，接入含0.5?mg/L?NAA的MS培養基中，先在熒光燈下培養5天，然后轉入藍紅比3:1的LED光源下培養35天，所有培養光強均為60μmol·m^-2·s^-1,光周期為12小時,培養溫度26±2℃。

4）光源:本光源是由長為105個發光二極管燈頭和寬為30個發光二極管燈頭組成的長方形發光二極管組合光源和一個變壓器(APR1510H)來控制控制電壓（0-2.2伏）和電流（0-20毫安），從而調控光強的大小。?

有益效果

本發明提供了一種對甘藍型油菜組織培養光源控制技術。幼苗培養階段，所有LED光源對油菜幼苗的培養效果均優于熒光燈光源。藍紅比為3:1的LED混合光源最適合甘藍型油菜組培幼苗的生長，是可以應用于甘藍型油菜組織培養再生成植株全過程的光源。替代通常所用的熒光燈光源，克服熒光燈光源能耗高、效率低、壽命短、廢棄燈管污染環境等缺點。

本發明的光源控制技術具有以下優點：1)操作簡單，效果好；2）節省能源環保；3）植株生長快速健壯。本發明方法和結果為開展與甘藍型油菜組織培養有關的生物學研究和開發提供了新的途徑和依據。?