[發明專利]一種檢測降鈣素原的試劑盒

有效

• 申請號: 201110210250.4
• 申請日: 2011-07-26
• 公開（公告）號: CN102305858A
• 公開（公告）日: 2012-01-04
• 發明（設計）人: 陸春;鄭筱雯;陳明鋒
• 申請（專利權）人: 深圳市國賽生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/531;G01N33/535;G01N21/76
• 代理公司: 深圳新創友知識產權代理有限公司 44223
• 代理人: 江耀純

技術領域

本發明涉及降鈣素原的檢測技術，特別是涉及一種檢測降鈣素原的試劑盒。

背景技術

近些年來，對全身性感染的病理、生理過程有了更多了解，支持強化治療也獲得顯著改善，但在非心臟重癥監護病房中患者的首位死因仍然是全身性感染及其并發癥。美國每年大約有500000例全身性感染患者，約40％最終死亡。因此，需要一種標記物能更有效地反映感染導致的炎癥損傷程度。降鈣素原(procalcitonin，PCT)是具有高靈敏度、特異性的新指標，它在細菌或真菌感染合并嚴重全身系統反應或器官低灌注時顯著升高，而在病毒或局灶感染時水平正常或輕度升高。這個特性使得PCT用來鑒別系統感染和非感染性炎癥或局灶感染。?

降鈣素原（Procalcitonin,PCT）是人降鈣素的前體物。降鈣素原來自定位于第11號染色體上(11p15，4)的單拷貝基因，該基因由2800個堿基對組成，含6個外顯子和5個內含子，基因全長M_r約7600。轉錄后在甲狀腺濾泡旁細胞粗面內質網內翻譯成降鈣素原前體proprocalcitonin，由116個氨基酸殘基組成，包括N端84個氨基酸、活性降鈣素(CT，32肽)和降鈣蛋白(katacalcin，21肽)三部分，PCT的相對分子量為13KD。在正常情況下，具有激素活性的降鈣素是在甲狀腺濾泡旁細胞產生與分泌，并由細胞內特殊蛋白酶分解PCT成降鈣素。

正常健康人體內PCT水平很低(<0.05ng/mL)。血清PCT濃度≤0.5ng/mL出現重癥敗血癥和／或敗血癥休克的風險較低；血清PCT濃度≥2ng/mL出現重癥敗血癥和／或敗血癥休克的風險較高。在細菌感染(特別是膿毒血癥、革蘭陰性桿菌)引起的全身炎癥反應時血清PCT水平常顯著增高，其增高程度與感染嚴重程度和死亡率呈正相關。在全身細菌感染患者血清PCT濃度升高比C反應蛋白（CRP）及其它炎性因子出現早，在感染2h出現升高，6h急劇上升，8～24h維持高水平，且對全身與局部細菌性感染的鑒別具有特殊價值。PCT在血中半衰期為22～29h，檢測不受臨床用藥影響；是療效觀察和預后觀察的重要指標。非細菌感染時血清PCT濃度不升高，因而可以鑒別二者。在膿毒血癥的輔助和鑒別診斷方面，與其它炎癥指標相比，PCT被認為是目前最敏感和最特異的膿毒血癥診斷指標。隨著細菌耐藥性、重癥感染患者的增加，在快速診斷顯得愈發重要。近年來發現，在全身嚴重細菌感染、敗血癥及多種器官功能失調綜合征的輔助診斷方面，降鈣素原(PCT)是一個具高靈敏度、高特異性的新指標，不僅能早期鑒別細菌與非細菌感染，更是敗血癥的預警和診斷指標，且PCT與細菌感染的程度成正相關，因此越來越受到臨床重視。

目前，PCT在臨床中的應用主要有以下方面。

1）自身免疫性疾病???與其他標記物如血沉、C反應蛋白不同，炎癥性疾病(如紅斑狼瘡、結締組織病、反應性關節炎和炎癥性腸病)活動期間PCT值無顯著性變化。Tamaki等檢測99例系統性自身免疫病患者，細菌感染組的PCT水平顯著高于免疫病活動組(兩組的PCT值分別為：4.539±9.677和0.116±0.127，P<0.001)，PCT診斷細菌感染的準確性是0.797，敏感性53.3%?，特異性97.1％?。PCT不受自身免疫病活動影響，僅在全身感染時顯著升高，因此PCT可用來鑒別自身免疫病活動與是否同時合并感染，且它不受使用激素劑量和其他免疫抑制因素的影響。

2）器官移植的監測

Hammer等對78例心臟或肺臟移植患者研究顯示，急性排異期C反應蛋白和白細胞記數升高，而PCT無變化。合并全身細菌或真菌感染時PCT＞1ng/mL，因此PCT可用來鑒別急性排異反應與感染。病毒或局灶感染時PCT正常或輕微升高，PCT＜1ng/mL。肝臟移植后的急性排異反應并未影響術后的PCT值。腎臟移植后存在排異反應的患者與對照組間PCT值差異亦無顯著性。PCT濃度不受免疫抑制劑如硫唑嘌呤、環孢菌素和他克羅姆的影響，口服激素以及急性排異期大劑量激素沖擊治療對PCT水平無影響。但使用鼠單克隆CD3單抗抗腎移植排異反應時PCT濃度升高，類似細胞因子釋放。CD3單克隆抗體引起大量腫瘤壞死因子-a釋放，腫瘤壞死因子-a促進PCT?mRNA表達。CD3單克隆抗體治療后PCT升高不提示合并感染。PCT為器官移植術后鑒別急性排異反應與細菌、真菌及病毒感染提供了方法。

3）膿毒癥??