[發明專利]靶標的檢測方法、背景的上升抑制方法和檢測裝置

無效

• 申請號: 201110209179.8
• 申請日: 2011-07-22
• 公開（公告）號: CN102346187A
• 公開（公告）日: 2012-02-08
• 發明（設計）人: 大沼直嗣;高木美佳子
• 申請（專利權）人: 愛科來株式會社
• 主分類號: G01N33/566
• 分類號: G01N33/566
• 代理公司: 北京東方億思知識產權代理有限責任公司 11258
• 代理人: 肖善強

本申請要求2010年7月23日提出的日本申請特愿2010-166413為基礎的優先權，將其公開的所有內容援引于此。

技術領域

本發明涉及靶標的檢測方法、背景的上升抑制方法和檢測裝置。

背景技術

以往，作為定性地或定量地分析試樣中的靶標的方法，廣泛利用結合測定(binding?assay)法。上述結合測定法，例如是使用可與靶標結合的2種結合物的方法。上述結合物，例如通常為靶標的抗體。該方法中，一種抗體固定于磁性粒子等載體(以下稱為“固定抗體”)，另一種抗體結合酶等標記物(以下稱為“標記抗體”)。并且，在反應體系中，使上述靶標、上述固定抗體和上述標記抗體反應。由此，上述固定抗體和上述標記抗體分別與上述靶標結合，形成它們的復合體。但是，在上述反應體系中，含有未參與上述復合體的形成的未反應的游離的上述標記抗體。在此，通過B(Bond)/F(Free)分離，將上述反應體系中的、含有上述標記抗體的上述復合體和游離的上述未反應的上述標記抗體分離。由此，能夠不受游離的上述未反應的上述標記抗體的影響地檢測到上述復合體中的上述標記抗體的信號。由于上述復合體中的上述標記抗體的量與上述復合體中的上述靶標存在相關關系，因而能夠由上述信號分析上述靶標(例如，日本特開平8-29424號公報)。

發明內容

本發明的目的在于，提供精度優良的靶標的檢測方法、背景的上升抑制方法和檢測裝置。

本發明的靶標的檢測方法，其特征在于，使用被固定于載體的第1靶標結合物和被標記物標記的第2靶標結合物，并且包括如下工序：復合體形成工序，在第1容器中，使靶標、上述第1靶標結合物和上述第2靶標結合物反應，形成上述靶標、上述第1靶標結合物和上述第2靶標結合物的復合體；復合體移動工序，將上述復合體從上述第1容器移動到第2容器中；和復合體檢測工序，在上述第2容器中，通過檢測上述標記物來檢測上述復合體。

本發明的靶標的檢測中的背景的上升抑制方法，其特征在于，使用被固定于載體的第1靶標結合物和被標記物標記的第2靶標結合物，并且包括如下工序：復合體形成工序，在第1容器中，使靶標、上述第1靶標結合物和上述第2靶標結合物反應，形成上述靶標、上述第1靶標結合物和上述第2靶標結合物的復合體；復合體移動工序，將上述復合體從上述第1容器移動到第2容器中；和復合體檢測工序，在上述第2容器中，通過檢測上述標記物來檢測上述復合體。

本發明的檢測裝置，其特征在于，用于上述本發明的靶標的檢測方法，具有第1容器、第2容器、移動單元和檢測單元，上述第1容器為上述本發明的靶標的檢測方法中的上述第1容器，上述第2容器為上述本發明的靶標的檢測方法中的上述第2容器，上述移動單元為將上述復合體從上述第1容器移動到上述第2容器中的單元，上述檢測單元為在上述復合體檢測工序中檢測上述標記物的單元。

在前述現有的上述結合測定法中，被標記的上述結合物與上述靶標以外的物質非特異性結合時，產生起因于上述非特異性結合的信號。因此，例如，背景上升，分析精度降低。因此，抑制起因于上述非特異性結合的信號的產生，是在分析精度方面重要的課題。這樣的問題，認為其原因在于，例如上述標記抗體對上述磁性粒子等上述載體的非特異性結合。在此，為了抑制對上述載體的非特異性結合，在上述結合測定法中，例如嘗試了將上述載體的表面用牛血清清蛋白、酪蛋白和明膠等封閉劑(blocking?agent)進行處理的方法、向上述反應體系中添加表面活性劑、使用除去了Fc區的抗體等。但是，即使通過這些方法，仍然存在由于未反應的上述標記抗體的影響而得不到充分的分析精度的問題。近年來，從要求更高精度的觀點出發，也期望確立抑制未反應的上述標記抗體的影響、更進一步提高分析精度的方法。另外，該問題不受抗體限制，對于可與靶標結合的其他結合物而言，也同樣存在結合測定法中的問題。