[發(fā)明專利]一種從迎春花葉中提取迎春花素的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110208800.9
• 申請日: 2011-07-25
• 公開（公告）號: CN102250174A
• 公開（公告）日: 2011-11-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 盧成英;羅玉燕;李克剛;陳功錫;于華忠
• 申請（專利權(quán)）人: 吉首大學(xué)
• 主分類號: C07H17/08
• 分類號: C07H17/08;C07H1/08;A61P31/00
• 代理公司: 張家界市慧誠商標(biāo)專利事務(wù)所 43209
• 代理人: 高紅旺

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及植物有效成分提取工藝領(lǐng)域，具體涉及一種有抑菌作用的迎春花葉活性化合物單體提取工藝。

背景技術(shù)

迎春花(Jasminum?nudiflorum?Lindl.?)系木犀科茉莉花屬植物，其生命力極強(qiáng)，早春春寒料俏之時(shí)即綻放出串串金黃色花朵，為我國優(yōu)秀的園林綠化美化品種，長江流域各地域廣有栽培?！侗静菥V目》中述迎春花治腫毒惡瘡，亦為湘西民間常用草藥，其葉苦、澀、平、無毒，可解毒清熱、止血、止痛，用于治療跌打損傷、外傷出血、口腔炎、婦科炎癥、癰癤腫毒和外陰搔癢等癥?；ǔＷ鞑栾?，其味甘、澀、平，清熱利尿、解毒，可治療頭痛發(fā)熱、泌尿系統(tǒng)感染和下肢潰瘍。文獻(xiàn)記載迎春花的枝、葉含丁香甙（Syringin）、迎春花苷(Jasmiflorin)和迎春花苦味質(zhì)(Jasmipierin)。國外已有迎春花葉化學(xué)組分的報(bào)道，但是對迎春花化學(xué)組分的生物活性及其活性物提取分離的研究尚未見報(bào)道，為此申請者檢測了迎春花葉的抑菌活性并對活性物進(jìn)行提取分離研究，從迎春花葉中分離到一具較強(qiáng)抑菌活性的單體，經(jīng)理化檢測和HPLC、IR、¹H-NMR、¹³C-NMR、EI-MS、DEPT等波譜數(shù)據(jù)分析確認(rèn)為迎春花素。已知迎春花素結(jié)構(gòu)如下:

在此研究基礎(chǔ)上重復(fù)、改進(jìn)、擴(kuò)大實(shí)驗(yàn)，獲迎春花素提取純化新技術(shù)。

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發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種從迎春花葉中提取高純迎春花素（jasminin）的方法，該方法操作簡便、生產(chǎn)周期短、成本低廉、易于進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。

本發(fā)明的實(shí)施方案為：一種從迎春花葉中提取迎春花素的方法，包括以下步驟：

（1）迎春花葉45℃烘干，粉碎，過40目篩，加入80%~90%乙醇溶液浸提3次，浸提溫度50～60℃，收集提取液，真空濃縮，回收濃縮液；

（2）濃縮液用石油醚常溫萃取3～5次、所得水相再用乙酸乙酯常溫萃取3～5次，每次萃取時(shí)間為2h；

（3）收集乙酸乙酯相萃取物，真空濃縮；

（4）將濃縮物進(jìn)行硅膠柱層析，氯仿-甲醇溶劑梯度洗脫，收集洗脫液濃縮；

（5）濃縮物乙醇溶解，結(jié)晶，干燥得到白色結(jié)晶化合物，即為目標(biāo)化合物。

????步驟（1）中，3次浸提時(shí)間分別為2h、1h、1h，每次料液質(zhì)量體積比為1g:6～8ml。浸提最適溫度為60℃。

????步驟（3）中，濃縮溫度為50～60℃。

????步驟（4）中，氯仿-甲醇梯度洗脫時(shí)，氯仿和甲醇的體積比分別為2:1、3:1、4:1，收集氯仿和甲醇體積比為3:1時(shí)所得洗脫液進(jìn)行濃縮。

本發(fā)明產(chǎn)品經(jīng)HPLC分析確認(rèn)為迎春花素，純度≥95%。產(chǎn)品經(jīng)平板紙片法、試管法檢測具有較強(qiáng)的抑菌活性。本發(fā)明的產(chǎn)品可用于制備抗菌制劑、原料或抗菌先導(dǎo)化合物進(jìn)行深度開發(fā)利用的研究。

本發(fā)明的創(chuàng)新點(diǎn)如下?：（1）本發(fā)明采用的系列方法技術(shù)較為簡便、易于操控、生產(chǎn)周期短、生產(chǎn)成本低；（2）本發(fā)明提取的迎春花素經(jīng)HPLC分析，純度≥95%，具有較高的抑菌活性；（3）提取溶劑材料可回收利用，對環(huán)境污染很小。

具體實(shí)施方案

以下以具體實(shí)施例來說明本發(fā)明的技術(shù)方案，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不限于此。

以下實(shí)施例中所述產(chǎn)品得率計(jì)算方式為：

產(chǎn)品得率（%）=產(chǎn)品質(zhì)量/迎春花葉原料質(zhì)量×100。

以下實(shí)施例中所述產(chǎn)品中迎春花素高效液相色譜（HPLC）檢測條件為：色譜柱Waters?YWG?C₁₈(5μm,?3.9mm?×?150mm)；流動(dòng)相:乙睛：水=30：70；柱溫為室溫；檢測波長：240nm；進(jìn)樣量?10μl；流速?1.0ml/min。

實(shí)施例1：

將250g迎春花葉粉，加入80%乙醇2000ml，?60℃浸提2h、抽濾，取濾渣加80%乙醇1000ml第2次提取，?60℃1h、抽濾，取濾渣加80%乙醇1000ml第3次提取，?60℃1h、抽濾，合并3次濾液，濃縮，濃縮溫度≤55℃，濃縮至無乙醇。濃縮液中加等量石油醚萃取3-5次，取下層水相，加等量乙酸乙酯萃取，重復(fù)3-5次，合并乙酸乙酯萃取液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮。濃縮物進(jìn)行硅膠柱層析，氯仿-甲醇梯度洗脫，收集洗脫液濃縮。濃縮物加90%乙醇析晶。重結(jié)晶2-3次得到的白色晶體3.15g。產(chǎn)品得率為1.26%，經(jīng)HPLC檢測迎春花素含量為98.06%。

實(shí)施例2