[發(fā)明專利]含有黃芪皂苷類活性成分的組合物及其制備方法和應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110208632.3
• 申請日: 2011-07-25
• 公開（公告）號: CN102232962A
• 公開（公告）日: 2011-11-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 許瓊明;陳重;劉艷麗;劉江云;張苗苗;賈丹;楊世林
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州大學(xué)
• 主分類號: A61K31/7048
• 分類號: A61K31/7048;A61K31/704;A61P35/00
• 代理公司: 蘇州創(chuàng)元專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 32103
• 代理人: 范晴

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥現(xiàn)代化技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種含有黃芪皂苷類活性成分的組合物及其制備方法。

背景技術(shù)

黃芪為豆科植物蒙古黃芪Astragalus?membranaceus(Fisch.)Bge.Var.mongholicus(Bge.)Hsiao和膜莢黃芪Astragalus?membranaceus(Fisch.)Bge的根，膜莢黃芪主產(chǎn)于黑龍江、內(nèi)蒙古、山西等地，其根為圓柱狀，上粗下細(xì)，少有分枝，長20-60cm，直徑1-3cm。氣特異，味微甜。其味甘，性溫，歸肺、脾經(jīng)。黃芪具有益氣升陽，托毒生肌之功，有“瘡家圣藥”之譽(yù)，故常用于氣血不足者。

黃芪皂苷類有效成分根據(jù)黃芪種類的不同有所不同，膜莢黃芪根含有黃芪苷I、II、III、IV、V、VI、VIII，乙酰黃芪苷(acetylastrgaloside)I，異黃芪苷(isoastragaloside)I、II，大豆皂苷I，膜莢黃芪苷(astramembrannin)I、II。蒙古黃芪根含有黃芪苷I、II、II，大豆皂苷(soyasaponin)I，胡蘿卜苷(daucosterol)，β-谷甾醇(β-sitosterol)，羽扇豆醇(lupeol)，α-聯(lián)苯雙酯(dimethyl-4，4’-dimethoxy-5，6，5’，6’-dimethylene-dioxybiphenyl-2，2’-dicarboxylatc)。

黃芪對免疫系統(tǒng)、機(jī)體代謝、造血功能等方面具有一定影響。大量實驗表明，黃芪注射液腹腔注射能明顯防治環(huán)磷酰胺所致大鼠外周白細(xì)胞數(shù)和骨髓巨核細(xì)胞數(shù)的降低，肌注還能明顯促進(jìn)外周血中性粒細(xì)胞于Boyden氏小室內(nèi)的隨機(jī)運動和趨化運動。臨床研究表明，黃芪煎劑可促進(jìn)正常人及腫瘤病人的淋轉(zhuǎn)率，黃芪注射液可顯著提高流行性出血熱患者PHA淋轉(zhuǎn)達(dá)率及活性E-花形成率。有報道黃芪可使體外培養(yǎng)的人胎腎細(xì)胞及地鼠、小鼠腎細(xì)胞生長旺盛的生存時間增長，并能延長人胎肺二倍體細(xì)胞的自然衰老過程，是其衰老壽命從原之61代延長至88-98代。

現(xiàn)有黃芪總皂苷制備工藝多采用水或含醇水提取，然后經(jīng)酸或堿處理后經(jīng)大孔吸附樹脂柱吸附，用適當(dāng)濃度的含水醇洗脫、濃縮干燥制得。此種工藝的缺點是黃芪提取液經(jīng)酸或堿處理后，黃芪甲苷的含量明顯增加，改變了原植物中天然皂苷的種類和固有的比例；并且由此種工藝的得到包含黃芪皂苷類活性成分的組合物含有鞣質(zhì)等雜質(zhì)，總皂苷的含量低于50％。另一方面，現(xiàn)有技術(shù)對產(chǎn)品中黃芪總皂苷的成份組成并不確定，因而實際生產(chǎn)中難以獲得組成穩(wěn)定、工藝可控性好的產(chǎn)品。目前文獻(xiàn)藥物分析雜志，2009，29(7)：1155-1158對黃芪總皂苷的含量測定方法多采用分光光度法，此法干擾大，靈敏度差，準(zhǔn)確度低。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的在于提供一種含有黃芪皂苷類活性成分的組合物，解決了現(xiàn)有技術(shù)中黃芪提取物中黃芪總皂苷的含量低于50％以及含有較多雜質(zhì)，其藥理活性差等問題。

為了解決現(xiàn)有技術(shù)中的這些問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是：

一種含有黃芪皂苷類活性成分的組合物，其特征在于所述組合物含有黃芪甲苷、黃芪皂苷I、黃芪皂苷II、人參皂苷Rb2、異黃芪皂苷I和乙酰黃芪皂苷I組分，且上述皂苷在組合物中總含量為60～100％。優(yōu)選的，上述皂苷在組合物中總含量為60～90％。更優(yōu)選的，上述皂苷在組合物中總含量為70～90％。

優(yōu)選的，所述組合物中黃芪甲苷的含量為5～25％。更優(yōu)選的，所述組合物中黃芪甲苷的含量為10～25％。

本發(fā)明還提供了一種含有黃芪皂苷類活性成分的組合物的制備方法，其特征在于所述方法包括以下步驟：

(1)以黃芪為原料采用乙醇/水混合溶媒進(jìn)行提取濃縮，然后加適量水稀釋，靜置6～24小時，過濾，得黃芪提取物；

(2)將步驟(1)獲得的黃芪提取物采用預(yù)處理的大孔樹脂進(jìn)行吸附分離純化，依次采用純水、濃度為10％～30％乙醇洗脫除去雜質(zhì)，然后用濃度為35％-90％乙醇洗脫并富集洗脫液，濃縮，干燥，得黃芪皂苷粗品；

(3)將黃芪皂苷粗品采用反相C18填料進(jìn)行柱層析分離提純，經(jīng)濃度為20％～60％甲醇洗脫除去雜質(zhì)后收集濃度為100％甲醇時的洗脫液；洗脫液濃縮后二次上樣，用濃度為20％～65％甲醇洗脫后，收集濃度為60％～85％甲醇時的洗脫液，合并，濃縮，即得含有黃芪皂苷類活性成分的組合物。

優(yōu)選的，方法步驟(2)中所述大孔樹脂選用非極性AB-8大孔樹脂，采用大孔樹脂進(jìn)行洗脫的程序按水、30％和90％乙醇梯度洗脫。