[發明專利]一種生物納米材料及其制備方法和核酸復合物

有效

• 申請號: 201110202075.4
• 申請日: 2011-07-19
• 公開（公告）號: CN102886049A
• 公開（公告）日: 2013-01-23
• 發明（設計）人: 席真;高爽;呂琳;張偌瑜
• 申請（專利權）人: 南開大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K47/42
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 陳小蓮;王鳳桐

1.一種生物納米材料的制備方法，其特征在于，該方法包括，選擇所需長度的核酸并將該核酸與蛋白進行組裝孵育，得到該生物納米材料，所述核酸能夠起始與所述蛋白之間的組裝，所述組裝孵育的條件使得所述核酸被所述蛋白包裹，從而核酸酶不能通過包裹核酸的蛋白與核酸接觸；其中，所述核酸的長度與所述生物納米材料的粒度之間成線性關系，選擇所需長度的核酸的方法包括，根據所需的生物納米材料的粒度確定所需核酸的長度。

2.根據權利要求1所述的方法，其中，所述根據所需的生物納米材料的粒度確定所需核酸的長度的方法包括以下步驟：

(1)設所述核酸的長度與所述生物納米材料的粒度符合線性方程Y＝aX，其中，X為所述核酸的長度，單位為核酸中核苷酸的數目，Y為所述生物納米材料的粒度，單位為納米，a為比例系數；選取兩種以上具有不同長度的所述核酸，長度分別記為X₁到X_m，其中m表示選取的具有不同長度的核酸的數目，m為大于1的整數；將所述具有不同長度的核酸分別與蛋白進行組裝孵育，得到相應的生物納米材料，測定每個生物納米材料的粒度，相應的記為Y₁到Y_m，以Y對X作圖，通過線性擬合得到a值；

(2)將所需的生物納米材料的粒度Y’代入步驟(1)中得到的線性方程，計算所需核酸的長度X’。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其中，所述生物納米材料具有與病毒相同或類似的結構，所述蛋白相當于病毒的殼蛋白，所述核酸相當于病毒的核酸中的至少一部分，優選地，該生物納米材料具有與煙草花葉病毒相同或類似的結構。

4.根據權利要求3所述的方法，其中，所述核酸為核糖核酸，且所述核酸含有SEQ?ID?NO：1所示的序列，優選地，所述核酸含有SEQ?ID?NO：2所示的序列。

5.根據權利要求3所述的方法，其中，所述核酸的長度為20-20000個核苷酸。

6.根據權利要求3所述的方法，其中，所述蛋白為與煙草花葉病毒殼蛋白的氨基酸序列具有90％以上同源性的突變體，且該蛋白能夠與含有SEQ?ID?NO：1所示序列的核酸進行自組裝。

7.根據權利要求6所述的方法，其中，所述蛋白為煙草花葉病毒的殼蛋白。

8.根據權利要求3-7中任意一項所述的方法，其中，所述組裝孵育的條件為煙草花葉病毒的殼蛋白與煙草花葉病毒的核酸能夠進行體外自組裝的條件。

9.根據權利要求8所述的方法，其中，所述組裝孵育在緩沖溶液中進行，所述組裝孵育的條件包括，緩沖溶液的離子強度為0.05-0.2摩爾，pH值為6.8-7.2，溫度為10-40℃，時間為0.1-12小時。

10.根據權利要求1-9中任意一項所述的方法，其中，該方法還包括在所述生物納米材料的內外表面修飾功能層，所述修飾功能層的方法包括，在保持生物納米材料完整性的條件下，將能夠與所述蛋白表面的活性基團發生反應的物質與所述生物納米材料混合。

11.根據權利要求10所述的方法，其中，能夠與所述蛋白表面的活性基團發生反應的物質為金納米顆粒、反應性熒光基團和靶向性基團中的至少一種。

12.權利要求1-11中任意一項所述的方法制得的生物納米材料，其特征在于，該生物納米材料中的所述核酸為核酸藥物。

13.根據權利要求12所述的生物納米材料，其中，所述核酸藥物為RNA藥物，所述核酸藥物的長度為40-300個核苷酸。

14.根據權利要求13所述的生物納米材料，其中，所述核酸藥物為莖環結構，所述莖環結構能夠被核糖核酸酶降解成含有siRNA序列的片段，所述莖環結構中的環部分和部分莖部分形成含有SEQ?ID?NO：1所示序列的核酸片段，所述莖環結構中的環部分和部分莖部分優選形成含有SEQ?ID?NO：2所示序列的核酸片段；所述核糖核酸酶優選為Dicer核酸酶。

15.一種核酸復合物，該核酸復合物含有載體和負載在載體上的核酸藥物，其特征在于，所述載體為蛋白，所述核酸藥物被蛋白所包裹，且核酸酶不能通過包裹核酸藥物的蛋白與核酸藥物接觸。