[發明專利]6-(4-(二氟甲氧基)-3-甲氧基苯基)噠嗪-3(2H)-酮在制備抗腫瘤藥物中的用途

有效

• 申請號: 201110196266.4
• 申請日: 2011-07-13
• 公開（公告）號: CN102872017A
• 公開（公告）日: 2013-01-16
• 發明（設計）人: 樓麗廣;胡有洪;趙紅兵;林世軍;謝成英;邢唯強;全海天;李德文
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海藥物研究所
• 主分類號: A61K31/50
• 分類號: A61K31/50;A61P35/00
• 代理公司: 北京金信立方知識產權代理有限公司 11225
• 代理人: 朱梅;王榮

技術領域

本發明屬于藥物學領域，涉及6-(4-(二氟甲氧基)-3-甲氧基苯基)噠嗪-3(2H)-酮的用途，具體涉及該化合物在制備抗腫瘤藥物，尤其是抗肝癌藥物中的用途。

背景技術

6-(4-(二氟甲氧基)-3-甲氧基苯基)噠嗪-3(2H)-酮，商品名：扎達維林(Zardaverine)為磷酸二酯酶PDE?III及PDE?IV的抑制劑，臨床用作麻醉輔助藥(骨骼肌松弛藥)。與扎達維林相關的專利(WO?2001094319、DE?4310051、DE4207822、EP?523513、EP?163965、US4665074)主要涉及其抗炎或抗免疫方面的用途，而對其在抗腫瘤方面的應用未見報道。

眾所周知，肝癌是第五大常見的男性腫瘤疾病，是第八大常見的女性腫瘤疾病。在2007年，估算的新增肝癌患者將有80％在發展中國家中產生，僅我國就占了總數的55％。而在發展中國家，59％的肝癌可歸咎于HBV，33％的肝癌可歸咎于HCV。尤其近年來，由于亞太國家乙肝病毒感染肆虐，肝癌發病率不斷上升，對治療肝癌藥物有巨大的市場需求。

發明內容

本發明的一個目的是公開式I所示的6-(4-(二氟甲氧基)-3-甲氧基苯基)噠嗪-3(2H)-酮在制備抗腫瘤藥物，尤其是抗肝癌藥物中的用途。

本發明人通過體外和體內實驗首次發現6-(4-(二氟甲氧基)-3-甲氧基苯基)噠嗪-3(2H)-酮在抗腫瘤方面的藥理作用。具體而言，6-(4-(二氟甲氧基)-3-甲氧基苯基)噠嗪-3(2H)-酮在抗肝癌方面表現出很強的特異性，其對敏感細胞株BEL-7402及SMMC-7721的抑制活性與對不敏感細胞株(如HepG2、Hep3B或NCI-H460)的抑制活性相差近1000倍，同時其抗腫瘤作用在肝癌細胞BEL-7402體內裸鼠移植瘤模型中也得到了驗證。

附圖說明

圖1為扎達維林對人肝癌細胞Bel-7402裸小鼠移植瘤的劑量依賴性抑制瘤體生長的活性；

圖2為扎達維林對裸小鼠體重的影響。

具體實施方式

下面用實施例進一步說明本發明，但這些實施例并不限制本發明的保護范圍。

實施例1：扎達維林的體外抗腫瘤活性

RPMI?1640培養基、最低基礎培養基(Minimum?essential?medium，MEM)、Ham’s?F12培養基、杜爾貝考氏改良伊格爾氏培養基(Dulbecco’s?modified?Eagle’s?medium，DMEM)培養基、M199培養基、胎牛血清(fetal?bovine?serum，FBS)均購自BRL(Gaithersburg，USA)公司。磺酰羅丹明B(sulforhodamine?B，SRB)購自Sigma-Aldrich(St?Louis，Mo，USA)公司。CO₂細胞培養箱為美國Thermo?Forma?Scientific(Marietta，OH，United?States)公司產品；倒置顯微鏡購自Olympus公司；CA-1390-1型超凈工作臺為上海凈化設備有限公司產品；BT?124S型十萬分之一天平為Sartorius公司產品；HF?safe?1500型連續加樣器為eppendorf公司產品；SPECTRA?MAX?190酶標儀為Molecular?Devices(Sunnyvale?CA，U.S.A.)公司產品。人肝癌細胞BEL-7402以及SMMC-7721購自中國科學院上海生科院生化細胞所細胞庫。其他人腫瘤細胞株HepG2、NCI-H460、Hep3B均購自美國典型培養物保藏中心庫(American?Type?Culture?Collection?Manassas，VA)。

實驗方法：化合物體外抗腫瘤活性采用磺酰羅丹明B方法。腫瘤細胞用RPMI?1640或DMEM培養基(Gibco)培養，內含10％胎牛血清，培養條件為37℃，5％CO₂。將BEL-7402、SMMC-7721、HepG2、Hep3B和NCI-H460細胞株分別接種于96孔板(0.4-1.0×10⁴細胞/孔)，24小時后，加入10倍稀釋的目標化合物扎達維林；目標化合物至少含5個濃度。化合物處理72小時后，棄去培養液，用10％冷三氯醋酸固定細胞。然后用磺酰羅丹明B溶液染色。洗去未結合SRB后，用Tris溶解與蛋白結合的SRB，用酶標儀在515nm波長下測定OD值，按以下公式計算細胞生長抑制率：