[發(fā)明專利]一種硫酸粘桿菌素預(yù)混劑的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110192805.7
• 申請日: 2011-07-11
• 公開（公告）號: CN102258765A
• 公開（公告）日: 2011-11-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 熊莉;孫振華;余煒;儲消和;吳雪萍
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江升華拜克生物股份有限公司
• 主分類號: A61K38/12
• 分類號: A61K38/12;A61K47/46;A61K47/02;A23K1/17;A61P31/04
• 代理公司: 湖州金衛(wèi)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 33232
• 代理人: 裴金華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及多肽類抗生素預(yù)混劑的制備，具體是一種硫酸粘桿菌素預(yù)混劑的制備方法。

背景技術(shù)

粘桿菌素（colistin）是一種對多重耐藥性革蘭氏陰性致病菌（如銅綠假單胞菌，Pseudomonas?aeruginosa）具有特效抗性的多肽類抗生素，粘桿菌素含有二氨基丁酸，存在游離氨基，因此呈堿性，在臨床上常制成鹽使用，目前商品化以兩種形式存在，硫酸粘桿菌素（colistin?sulphate，CS）是其中一種形式。硫酸粘桿菌素可用于豬、禽、牛和羊等動物，由于其抗菌作用強、殘留低，不易產(chǎn)生耐藥性，中國、美國、歐盟和日本等許多國家批準(zhǔn)作為飼料添加劑或獸藥。可治療多種病菌引起的動物飼養(yǎng)疾病，并能促進(jìn)動物生長和提高飼料的利用率。

目前從發(fā)酵液中分離硫酸粘桿菌素主要有：離子交換法、泡沫分離法。采用離子交換法，此方法分離步驟長、能耗高，而且?guī)泶罅繌U水，嚴(yán)重污染環(huán)境。2006年7月12日公開的申請?zhí)枮?00510122187.3的發(fā)明公開了一種泡沫分離法制備多粘菌素E的方法，起泡用到溶劑，給環(huán)境帶來污染，且成本較高。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，經(jīng)過申請人長期的研究和實驗，發(fā)明了一種制備硫酸粘桿菌素預(yù)混劑的新工藝，它不僅提高了硫酸粘桿菌素預(yù)混劑的收率，而且更加綠色環(huán)保。本發(fā)明采用先過濾除去發(fā)酵液中的菌體，再濃縮濾液，然后沉淀分離，最后流化床造粒，得到硫酸粘桿菌素預(yù)混劑，具有專一性強、工序短、設(shè)備投資少、收率高、成本低，而且整個過程不采用溶劑，減少環(huán)境污染等優(yōu)點。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：?

一種硫酸粘桿菌素預(yù)混劑的制備方法，其特征在于，它依次包括如下步驟：

（1）發(fā)酵液的預(yù)處理：將含有粘桿菌素的發(fā)酵液用酸調(diào)pH為2.0~3.5，邊攪拌邊加入2~5%wt的助濾劑后過濾；

（2）減壓濃縮：將濾液在-0.095~-0.098Mpa下濃縮，溫度為50~90℃，濃縮后得到液相含量為25000~35000ug/ml的濃縮液；

（3）沉淀分離：將濃縮液用堿調(diào)pH為10.0~12.0，攪拌0.5~4?h，在0~10℃條件下靜止2~4?h，真空抽濾，得到濾餅，邊攪拌濾餅邊加入稀硫酸至pH為3.0~7.0，得到酸化液；

（4）流化床造粒：按酸化液與載體的重量比為60~80%的比例將酸化液輸入裝有載體的流化床造粒機中，進(jìn)風(fēng)溫度為140~200℃，出風(fēng)溫度為70~120℃，酸化液輸完后，造粒0.5~3?h，得到硫酸粘桿菌素預(yù)混劑。

具體來說，本發(fā)明先除去菌體，再進(jìn)行分離純化；濃縮濾液的目的在于提高濾液的濃度，粘桿菌素的含量會隨濾液濃度的提高而提高，這樣會提高粘桿菌素沉淀分離時的收率，對于生產(chǎn)硫酸粘桿菌素預(yù)混劑降低成本具有重要意義；沉淀分離是在一定的條件下將粘桿菌素以某種形式沉淀出來，雜質(zhì)溶解在溶質(zhì)中，過濾后得到固體，再將固體用硫酸酸化溶解，得到高純度的硫酸粘桿菌素溶液，起到分離純化的效果，專一性強，重要的是不像離子交換法產(chǎn)生大量的廢水，也不用到任何溶劑，不污染環(huán)境，成本低。

作為優(yōu)選，步驟（1）所述的酸為草酸、硫酸、鹽酸、磷酸的一種或多種。

作為優(yōu)選，步驟（1）所述的助濾劑為珍珠巖、硅藻土、纖維素、酸性白土、活性炭、石棉的一種或多種。

作為優(yōu)選，步驟（2）所述溫度為60~70℃。

作為優(yōu)選，步驟（3）所述堿為氫氧化鈉、氨水、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉的一種或多種。

作為優(yōu)選，步驟（3）所述用堿調(diào)pH為10.5~11.5。

作為優(yōu)選，步驟（3）所述用稀硫酸調(diào)pH為6.0~7.0。

作為優(yōu)選，步驟（4）所述的載體為稻殼粉、玉米芯粉、米糠粉、麥麩、苜蓿粉、碳酸鈣的一種或多種。

作為優(yōu)選，步驟（4）所述的進(jìn)風(fēng)溫度為170~180℃。

作為優(yōu)選，步驟（4）所述的出風(fēng)溫度為90~100℃。

本發(fā)明的主要優(yōu)點是與現(xiàn)有技術(shù)相比，專一性強、工序短、成本低、廢水少、污染少，而且收率高，達(dá)80~90%。

具體實施方式

以下實施例中所述粘桿菌素發(fā)酵液，由多粘芽孢桿菌產(chǎn)生的含有粘桿菌素的發(fā)酵液。

實施例1

（1）?發(fā)酵液的預(yù)處理

將發(fā)酵液用硫酸調(diào)pH值為3.0，邊攪拌邊加入3.5%wt的硅藻土助濾劑，通過板框過濾，至無濾液滴出為止，得到板框過濾液。板框過濾收率為96.5%。

（2）?減壓濃縮