[發明專利]疊加式固定床變相聚焦層析柱及分離方法

有效

• 申請號: 201110191736.8
• 申請日: 2011-07-08
• 公開（公告）號: CN102302866A
• 公開（公告）日: 2012-01-04
• 發明（設計）人: 倪寶謙;倪成
• 申請（專利權）人: 倪寶謙
• 主分類號: B01D15/08
• 分類號: B01D15/08;C12N9/48;C12N9/08;C07C227/40
• 代理公司: 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139
• 代理人: 孫皓晨;韓小雷

1.一種疊加式固定床變相聚焦層析柱，其至少具有一個工作單元，包括依次連接的進料管、用以進行層析的柱體、出料管及儲料罐，其特征在于，所述工作單元由若干柱段由下至上順次排列，每一柱段連接有一個變相器，所述變相器是由在所述柱體外的半透膜隔斷構成的容器和橫向切入柱芯內的柱芯隔斷板兩部分組成，還包括貫穿其中起連接作用的漿料輸液管線，其中，所述半透膜隔斷構成的容器是由半透膜構成分離的腔室，分別供待分離漿料和由輸液泵或輸液泵泵入的操作液短時間滯留和交換溶質，依賴半透膜兩側溶質的交換作用達到操作液物化參數的置換目的，所述柱芯隔斷板與柱體之間采取可拆卸的卡箍密封連接方式，所述漿料輸液管線的終端是柱芯隔斷板，該柱芯隔斷板的上下兩側分別設有互不導通的三通輸液通道及電磁閥門組，使得在變相器內經過調制后的料液經此分流到下一柱段。

2.根據權利要求1所述的疊加式固定床變相聚焦層析柱，其特征在于，根據分離漿料的性質，多組共性的柱段共用一個變相器。

3.根據權利要求1所述的疊加式固定床變相聚焦層析柱，其特征在于，所述柱體還包括篩板。

4.根據權利要求1所述的疊加式固定床變相聚焦層析柱，其特征在于，所述的柱體是由若干模包組件層疊緊固而成，所述的模包組件包括封套以及位于所述封套內部的柱芯，所述柱芯沿軸向是由數十乃至百，千層毫米級厚度的薄片疊加而成。

5.根據權利要求1所述的疊加式固定床變相聚焦層析柱，其特征在于多工作單元是將所述至少一個工作單元有序疊加，構成多單元疊加裝置。

6.一種采用柱層析連續分離蚓激酶、超氧化物歧化酶、復合氨基酸的方法，其特征在于采用權利要求1-5任一項所述的疊加式固定床變相聚焦層析柱，將一個工作單元的有效工作部分割為分別對EK、SOD、AA專一性截留的三類柱段，上柱液所攜帶的蚯蚓制品原始漿料樣品在變相器的輸液泵驅動下，在各柱段被依次截留或卸載，每一靶物質對應一組變相器來保障分離效果。

7.根據權利要求6所述的分離方法，其特征在于所述分離方法具體操作是按如下步驟進行：

1)柱床預處理：采用工作液A管線分別對分離介質進行酸，堿，水，buffer的清洗，平衡等預處理；

2)蚯蚓漿料上柱液由下至上經第一變相器，由分子篩AA柱段截流大分子蛋白質，收獲AA；

3)漿料繼續上行通過第二變相器，經工作液C調制后，進入弱陰離子交換劑EK柱段，EK被截留；

4)漿料繼續上行通過第三變相器，經工作液D調制后，進入強陰離子交換劑SOD柱段，SOD被截留；

5)工作液B管線分別對弱陰離子交換劑EK柱段，強陰離子交換劑SOD柱段泵入洗脫液，分別收獲EK，SOD；

至此完成一個工作單元對AA，EK，SOD的連續分離。

8.根據權利要求7所述的分離方法，其特征在于所述第一變相器、第二變相器和第三變相器所用半透膜選擇截留值分別為3000，35000，50000道爾頓，分別使用于AA，EK，SOD柱段。

9.根據權利要求6所述的分離方法，其特征在于柱芯工作部針對不同的靶物質有相應分離柱段，每個柱段具備對應于各自靶物質的柱芯環境，這些不同的柱芯區段彼此疊加以實現工作任務集約化，按照靶物質獲取的順序設計操作液的流徑，以實現多種靶物質大規模連續分離。