[發明專利]二聚兔耳風萜A在制備細胞核轉錄因子抑制劑藥物中的應用

無效

• 申請號: 201110191104.1
• 申請日: 2011-07-08
• 公開（公告）號: CN102319239A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發明（設計）人: 張衛東;蘇娟;單磊;柳潤輝;李慧梁;沈云亨;徐希科;劉慧
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫大學
• 主分類號: A61K31/365
• 分類號: A61K31/365;A61P35/02;A61P37/00;A61P13/12;A61P9/00;A61P25/28;A61P27/02
• 代理公司: 上海新天專利代理有限公司 31213
• 代理人: 王巍

技術領域

本發明涉及藥物，具體涉及大頭兔耳風提取物在制藥中的應用，尤其涉及化合物二聚兔耳風萜A在制備細胞核轉錄因子抑制劑藥物中的應用。

背景技術

NF-κB細胞核轉錄因子最早是從B細胞的核抽提物中發現的一種能與免疫球蛋白κ鏈基因的增強子κB序列(GGGACTTTCC)特異性結合的核蛋白因子，因而稱為NF-κB。此因子與κ序列的特異性結合后，促進κ輕鏈基因的表達。但后來越來越多的證據表明，這一因子可啟動眾多基因轉錄。調節包括細胞因子和炎癥介質在內的眾多蛋白質表達，從而參與調節細胞的生理、病理反應。

NF-κB的異常激活和很多疾病相關，例如惡性腫瘤、白血病、自身免疫性疾病、腎臟疾病、心腦血管疾病、各種炎癥、神經變形性疾病、眼科疾病發生時，其病變細胞均存在NF-κB的異常激活。因此NF-κB已成為一個重要的藥物作用靶點。針對NF-κB激活途徑中的不同環節為靶點進行拮抗，可以治療與之相關的疾病。

在白血病、實體瘤等的細胞中，NF-κB往往通過遺傳學改變或信號轉導異常而持續性激活。近年來的研究發現，NF-κB在白血病、實體瘤等的發生發展過程中具有重要且復雜的作用。總的來說，NF-κB的異常激活可導致一系列與惡性腫瘤相關基因的異常表達，從而抑制惡性細胞凋亡、促進腫瘤新生血管形成、誘導惡性腫瘤細胞耐藥等。NF-κB已成為抗腫瘤、白血病藥物研究的一個重要靶點，NF-κB抑制劑的研究為白血病治療提供了一種新的選擇，將NF-κB抑制劑和傳統放化療配合應用。由于其本身即有的抗白血病活性，又能顯著降低白血病細胞對化療藥物的耐藥性，因而，在白血病治療方面有著很好的應用前景。

兔耳風屬(Ainsliaea?DC)植物是菊科(Compositae)帚菊木族(Mutisieae?Cass)中的一屬，全世界70余種，中國有44種4變種，約占總數的37.5％，主要分布在長江流域及西南華南各省。兔耳風屬植物藥用種類較多，已廣泛用于治療感冒咳喘、風濕痹痛、跌打損傷、泌尿系統疾病等癥。《上海市藥材標準》、《江西省中藥材標準》、《云南省藥品標準》、《衛生部藥品標準》均有收載。對兔耳風屬植物的化學成分研究始于20世紀80年代，主要集中在杏香兔耳風和械葉兔耳風上。但對大頭兔耳風(Ainsliaea?macrocephala)化學成分的研究幾乎沒有。據報道兔耳風屬植物主要含有倍半萜內酯、倍半萜苷、甾體、三萜類化合物，研究表明倍半萜內酯具有很好的抗腫瘤活性。且現代藥理及臨床應用表明該屬植物有很好的抗炎作用。大頭兔耳風產于中國云南西北部和四川西南部，生于山坡林緣、針葉林下或山脊灌叢中，海拔2600～3100米，為多年生草本。《中國植物志》對大頭兔耳風的形態特征進行了詳細的描述。化合物二聚兔耳風萜A(Ainsliaidimer?A)是從生長于中國云南麗江的大頭兔耳風中提取分離得到的，其化學結構式I如下：

二聚兔耳風萜A化學結構式、制備方法已申請國家發明專利并獲授權(化合物二聚兔耳風萜A及其制備方法和應用，ZL200810035858.6)，公開了上述化合物的制備方法與在制備抗炎和抗腫瘤藥物中的應用。

本發明人對采集自云南的大頭兔耳風進行了系統的化學成分研究，發現其具有良好的對細胞核轉錄因子抑制生物活性，擬進行深入的研究開發新的適應癥藥物。

發明內容

本發明的目的在于進一步研究大頭兔耳風提取物對細胞核轉錄因子抑制的生物活性，設計新的應用。

本發明提供了化合物二聚兔耳風萜A在制備細胞核轉錄因子抑制劑藥物中的應用。

二聚兔耳風萜A化合物可按ZL200810035858.6公開的方法的制備。包括下列步驟：

二聚兔耳風萜A(1)提取：將大頭兔耳風全草，粉碎，以80～95％乙醇回流提取1～3次，每次1～2小時，提取液減壓濃縮成流浸膏，加水稀釋后先以石油醚萃取，再以乙酸乙酯萃取，得到乙酸乙酯部位；

(2)分離：將上述乙酸乙酯部位應用硅膠柱層析，以體積比為20∶0～4∶1的氯仿-甲醇系統梯度洗脫，薄層層析檢測，收集含二聚兔耳風萜A的流分，再經葡聚糖凝膠柱層析，以體積比為1∶1的氯仿-甲醇洗脫，最后經C18反相柱層析，以體積比為4∶6～6∶4的甲醇-水進行洗脫，薄層層析檢測，得二聚兔耳風萜A。