[發(fā)明專利]一種膽固醇分子印跡膜傳感電極及其檢測廢棄油脂的用途

無效

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• 申請日: 2011-07-08
• 公開（公告）號: CN102353707A
• 公開（公告）日: 2012-02-15
• 發(fā)明（設計）人: 趙曉聯;周智慧;朱秋勁;王捷;毛飛君
• 申請（專利權）人: 無錫市金坤生物工程有限公司
• 主分類號: G01N27/30
• 分類號: G01N27/30
• 代理公司: 無錫華源專利事務所 32228
• 代理人: 聶漢欽

技術領域

本發(fā)明涉及食品化學領域，具體的涉及一種用于檢測地溝油的膽固醇分子印跡膜傳感電極。

背景技術

我國是世界上植物油消費量最大的國家，每年產生大約200萬～300萬噸廢棄油脂，由于提煉工藝簡單，一些不法商人在利益的驅動下，將廢棄食用油脂（俗稱地溝油）摻入食用油進行銷售。在地溝油的加工提煉過程中產生的黃曲霉毒素是一種強烈的致癌物，毒性是砒霜的100倍，地溝油中還含有大量苯并芘、二噁英等致癌物質和其它有毒物質，進入食品渠道后會對人體健康造成極大危害。

現階段國內發(fā)展起來的檢測地溝油的方法有以下幾種：（1）電導率檢測法：由于油脂在烹飪過程中接觸了洗滌劑、金屬器皿，或長期停留在重金屬環(huán)境中，因此地溝油的電導率值明顯高于普通食用油，這種方法的缺陷在于只有在地溝油的添加量較高（如高于20%）時才能檢測到這種電導率的變化；（2）藍色試紙法：隨著所摻地溝油的比例不斷增加，油中的氯化鈉越積越多，藍色試紙會呈現換綠色、淡黃色和亮黃色等顏色變化，但是這一方法同樣受到地溝油添加比例的限制；（3）膽固醇檢測法：由于地溝油是多種動植物油脂混合物，動植物組織中都含有甾醇，動物油脂的特征性甾醇是膽固醇，而植物油中一般不含或含有極少量的膽固醇，通過測定油中膽固醇的量，即可判定植物油中是否含有動物油脂，從而判斷該油是否混有廢棄食用油脂。

常用的針對膽固醇的測定方法有：（1）色譜法：液相色譜法、氣相色譜法、薄層色譜法等，但是傳統的色譜法具有投資成本高、試劑消耗量大、前處理繁瑣、耗費時間較長等不足之處；（2）水解酶法：感測器的反應試劑層含有催化膽固醇氧化反應的酶、具有膽固醇酯水解活性的酶和其他添加劑，這種方法涉及到對活性酶的保存，穩(wěn)定性較差，保質期短。

目前利用分子印跡技術發(fā)展出很多新型的固相萃取、膜分離、免疫分析、抗體模擬、色譜固定器、仿生物傳感器、催化劑、合成酶等方法。分子印跡技術是指通過分子印跡聚合物對印跡分子（或稱模板分子）的“記憶”效應達到分子識別的目的。在形成分子印跡聚合物時，分子印跡聚合物內部形成了許多空穴，而且空穴之間有通道相連，通道的直徑與空穴的大小相近，因此通道能起到攔截非模板分子的作用。在分子印跡聚合物的復合層內，只有尺寸較小的模板分子可以通過通道，與空穴內的作用點位相互作用被識別，而結構不同的其他分子難以通過內部通道，因而不被識別。利用分子印跡復合膜分離層的這一特性，模板分子可以源源不斷地從膜一側轉移到另一側，而非模板分子則不會通過膜。

由于分子印跡聚合物對模板分子的識別具有專一性，而且穩(wěn)定性能好，因此其膜適合作為靈敏度較高的傳感器，但是由于分子印跡膜的制備存在很多技術難點，如需要針對不同的模板分子尋找合適的功能單體；由于制備出來的膜有脆性，需要合適的交聯劑來進行固化；需要要選擇合適的洗脫劑，不僅要能洗去模板分子，還要能保持膜內空穴形態(tài)等，目前其實際應用還受到了很大限制。

發(fā)明內容

針對上述技術問題，本發(fā)明提供了一種膽固醇分子印跡膜傳感電極，并利用這種電極來檢測植物油中是否摻雜了廢棄油脂。本發(fā)明選擇性好，靈敏度高，分析速度快，成本低，能在現場檢測，可以縮減取樣量、避免繁瑣的樣品預處理過程。

本發(fā)明的技術方案如下：?

一種膽固醇分子印跡膜傳感電極，由下述制備步驟得到：

（1）取絕緣電極基片，涂覆分離的工作電極和對電極，所述工作電極為圓形，對電極為環(huán)繞工作電極的半圓環(huán)形；

（2）在所述絕緣電極基片上對應步驟（1）的工作電極和對電極，用導電漿分別印制依次連接的工作電極連線和接線端子以及對電極連線和接線端子；

（3）在所述工作電極連線以及對電極連線表面涂覆一層絕緣層；在所述工作電極以及對電極的表面涂覆一層膽固醇分子印跡膜；

（4）所述膽固醇分子印跡膜的制備方法如下：

A、稱取膽固醇模板分子與功能單體溶于有機溶劑中，經過超聲波震蕩使其混合均勻，再向其中加入交聯劑，經過超聲波震蕩使其混合均勻，然后向其中加入引發(fā)劑和粘合劑，經過超聲波震蕩使其混合均勻，最后向該溶液中通入氮氣除氧，將所得溶液密封待用；

B、將步驟A所得的溶液滴加到工作電極和對電極表面，蓋玻片壓蓋，在365nm紫外光照射下進行聚合反應，合成含有膽固醇模板分子的薄膜；

C、將步驟B所得的承載膽固醇模板分子薄膜的電極用洗脫液進行洗脫，使膽固醇模板分子除去，直到最后一次洗脫液中檢測不到膽固醇模板分子存在，得到膽固醇分子印跡膜，將制備好的電極保存在雙蒸水中備用；