[發明專利]一種分離純化虎杖中白藜蘆醇的方法

有效

• 申請號: 201110183680.1
• 申請日: 2011-07-01
• 公開（公告）號: CN102304028A
• 公開（公告）日: 2012-01-04
• 發明（設計）人: 王軍;向玲麗;尹勝;李春燕;姚美村;楊潤潮;蘭晶;周少耿;鄭晶
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: C07C39/21
• 分類號: C07C39/21;C07C37/70
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 陳衛

技術領域

????本發明涉及藥物分離純化技術領域，具體涉及一種分離純化虎杖中白藜蘆醇的方法。

背景技術

????白藜蘆醇被喻為繼紫杉醇之后的又一新的綠色抗癌藥物，有顯著的抑制癌細胞、降低血脂、防治心血管疾病、抗氧化、增強免疫力、延緩衰老等作用。在制藥、食品、保健品和化妝品等行業中有及廣泛的應用。

近年來，以白藜蘆醇為活性成分的保健食品層出不窮：日本將白藜蘆醇作為食品添加劑加到各種酒中，配制出對心血管疾病有良好預防作用的低醇，高白藜蘆醇的新型保健佐餐酒；Paradise?her?Resveratrol及加拿大的Natrol?resveratrol，天津天獅集團的天獅活力康，上海納貝生物制品有限公司的益生膠囊均為含白藜蘆醇的保健品。

????白藜蘆醇分子結構中富含羥基，具有捕獲自由基，抗氧化能力，其分子中的二苯烯結構有吸收紫外光的能力，這些特性被化妝品行業充分應用。Lauder的白金級極致賦活精華及世界十五大護膚品AVEDA(肯夢)的新作-晶彩INNER?LIGHT新底妝系列美容產品中均含白藜蘆醇。

????白藜蘆醇已廣泛用于治療心血管疾病，動脈硬化和高血脂等疾病，在治療阿爾茨海默病、認知功能損害及其他predementia綜合征方面的效果已被醫學界證實并得到重視。據統計，現已批準上市的含白藜蘆醇高端藥物制劑已近1000種，全球使用者約2億人，并且以平均每年5000萬人的速度增長。白藜蘆醇制劑在未來8年內將形成巨大的產業，銷售額將達到5-8億美元。

白藜蘆醇在許多植物中都有分布，但蓼科植物虎杖中白藜蘆醇含量是最高的，達0.1-0.4%，是獲得天然白藜蘆醇的最理想資源。鑒于白藜蘆醇在醫藥，保健品、化妝品市場有越來越廣泛的應用，構建操作簡單，成本低廉，易于大批量獲得白藜蘆醇純品的分離純化技術，有廣泛的應用前景和重要意義。

發明內容

????本發明的目的在于根據現有技術中存在的上述不足，提供一種從虎杖中分離純化白藜蘆醇的方法，該方法操作簡單，成本低廉，易于大批量獲得白藜蘆醇純品。

????本發明上述目的通過以下技術方案予以實現：

????本發明的核心內容是根據虎杖的化學成份及白藜蘆醇的溶解特性，設計發明了對白藜蘆醇具有高選擇性的含丙酮-水-親脂性溶劑組成的堿性三元兩相液-液萃取系統，用該系統對虎杖中白藜蘆醇進行萃取分離純化，通過一步萃取操作，可使虎杖中白藜蘆醇得到定量富集，與其他非白藜蘆醇成分分開，再經結晶操作，得到純度大于85%白藜蘆醇產品。

????本發明分離純化虎杖中白藜蘆醇的方法具體包括如下步驟：

（1）提取：將干燥虎杖藥材粉碎，用丙酮-水作為提取溶劑進行提取；

（2）純化：在步驟（1）所得的提取液中加入親脂性溶劑，構成丙酮-水-親脂性溶劑組成的三元兩相液-液萃取系統，萃取完畢、靜置分層后，白藜蘆醇在親脂性溶劑富集相中富集濃縮；

（3）結晶：將富集了白藜蘆醇的親脂性溶劑減壓濃縮，放置析出白藜蘆醇。

作為一種優選方案，上述方法中，步驟（1）中所述丙酮-水的體積比為1:1~7:3；所述虎杖和丙酮-水的用量比為1:10（g/v）；鑒于白藜蘆醇的不穩定性，為了加速提取過程，縮短提取周期，所述提取過程采用超聲波輔助完成。

作為一種優選方案，上述方法中，步驟（2）中所述親脂性溶劑為乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、乙醚中的任意一種；所述丙酮-水-親脂性溶劑的體積比為5:5:3~7:3:6；所述三元兩相液-液萃取系統的pH值為弱堿性，為7.5~9；所述靜置分層的溫度為25~35℃，時間為40~80min。弱堿性萃取條件的設計有如下優點：虎杖中共存的大黃素、大黃酚等蒽醌類化合物的酸性比白藜蘆醇的酸性要強，在系統所設的弱堿性條件下，共存蒽醌類成份呈離子狀態，不被親酯性溶劑富集相萃取，只有白藜蘆醇被選擇性萃取，使選擇性大幅度提高。

與現有技術相比，本發明具有如下有益效果：

（1）本發明所述丙酮-水-親脂性溶劑組成的三元兩相堿性溶劑系統對白藜蘆醇有很高的萃取選擇性，在純化步驟中白藜蘆醇幾乎不損失，僅需一次液-液萃取，便可定量萃取虎杖提取液中白藜蘆醇，方法的提取產率極高，根據天然虎杖中白藜蘆醇的含量（通常為0.1~0.4%），可得相應的定量提取率，產率最高可達1%（按虎杖藥材干重計算），超過酶解、酸水解技術的提取率。