[發明專利]一種抑制細菌信號轉導系統PhoQ組氨酸激酶活性的制劑

有效

• 申請號: 201110182831.1
• 申請日: 2011-06-30
• 公開（公告）號: CN102847175A
• 公開（公告）日: 2013-01-02
• 發明（設計）人: 瞿滌;蔣華良;沈旭;蔡霞;陳明亮
• 申請（專利權）人: 復旦大學;中國科學院上海藥物研究所
• 主分類號: A61L2/18
• 分類號: A61L2/18;A61K31/165;A61P31/04;A61L101/32
• 代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

技術領域

本發明屬生物技術領域，涉及一種抑制細菌信號轉導系統PhoQ組氨酸激酶活性的制劑，具體涉及一種含有小分子化合物的細菌PhoQ組氨酸激酶抑制劑，尤其是對革蘭陰性菌的信號轉導系統PhoQ蛋白的抑制劑；所述的制劑對志賀菌信號轉導系統中PhoQ蛋白具有抑制作用，能抑制革蘭陰性菌生長，并抑制志賀菌的毒力。

背景技術

現有技術公開了志賀菌(Shigella)為革蘭陰性菌，是細菌性痢疾的病原體，主要通過糞-口途徑傳播，侵入結腸粘膜。有統計表明，在我國，細菌性痢疾是發病率僅次于病毒性肝炎和肺結核的第三大傳染病，血清型以福氏2a型為主。近年來，由于抗生素的不規范使用以及耐藥基因的水平傳播，志賀菌在臨床上呈現多重耐藥，對青霉素類、磺胺類、四環素類抗生素耐藥率極高，甚至對喹諾酮類、頭孢菌素類等目前臨床常用藥物的耐藥率也不斷上升，因此需要研究新的治療策略加以應對。

當前，抑制細菌毒力而不影響細菌的生長可能成為研究抑制劑的新策略；相比現有的以抑制或殺滅細菌為目的抗生素，抑制細菌毒力而不影響細菌生長可能使細菌處于低選擇壓力下而減少細菌變異的機會并降低細菌產生耐藥性的機率；同時，宿主與無毒或減毒的細菌相互作用，能夠產生足夠的免疫力對抗病原菌并徹底根除入侵的病原菌。因此，以細菌毒力因子為靶標已經成為發展新型抗菌藥物的新策略。

發明內容

本發明的目的是提供一種抑制細菌信號轉導系統PhoQ組氨酸激酶活性的制劑，尤其是對革蘭陰性菌的信號轉導系統PhoQ蛋白的抑制。

本發明對志賀菌雙組分信號轉導系統中的PhoQ蛋白(PhoQ組氨酸蛋白激酶)進行蛋白質結構三維模擬，并根據此模型，利用對接軟件進行虛擬，獲得能抑制志賀菌等革蘭陰性細菌毒力的小分子化合物；然后，將所述的小分子化合物與二甲基亞砜(DMSO)混合，制成抑制細菌信號轉導系統PhoQ組氨酸激酶活性的制劑。

具體而言，本發明所述的抑制細菌信號轉導系統PhoQ組氨酸激酶活性的制劑，其特征在于，由式(I)結構的小分子化合物(FDDDC1)和0.1-2％二甲基亞砜(DMSO)組成；

本發明中，所述的細菌為革蘭陰性菌，包括志賀菌、沙門菌或大腸桿菌。

本發明中，所述的小分子化合物FDDDC1具有抑制細菌毒力的功能，能有效抑制臨床常見的革蘭陰性菌，如志賀菌、沙門菌或大腸桿菌的毒力，且對哺乳動物細胞無明顯毒性；

本發明中，所述小分子化合物FDDDC1可通過市購(荷蘭SPECS公司)獲得。

本發明中，所述二甲基亞砜(DMSO)其分子式為(CH3)2SO，常溫下為無色無臭的透明液體，具有高極性、高沸點、熱穩定性好、非質子、與水混溶的特性，能溶于乙醇、丙醇、苯和氯仿等大多數有機物，可通過市購途徑獲得。

本發明通過蛋白結構分子模建和虛擬高通量篩選技術從已知結構的化合物庫中篩選出針對志賀菌組氨酸蛋白激酶PhoQ蛋白潛在的小分子抑制物(FDDDC1化合物)，經體外及體內生物學實驗證實，該小分子化合物FDDDC1能有效抑制志賀菌及幾種臨床常見的革蘭氏陰性菌的毒力，且對哺乳動物細胞沒有毒性。

本發明中，所述的小分子化合物FDDDC1具有如下優點：

(1)所述的小分子化合物在體外及體內能明顯抑制志賀菌的毒力；

(2)所述的小分子化合物不影響細菌的生長；

(3)所述的小分子化合物對哺乳動物細胞無毒性，且對人紅細胞無明顯的溶血作用；

(4)所述的小分子化合物與目的蛋白志賀菌組氨酸激酶PhoQ保守功能域片段有很強的結合力，且均能明顯抑制蛋白組氨酸激酶PhoQ的自身磷酸化活性。

本發明中，所述的小分子化合物FDDDC1與0.1-2％二甲基亞砜(DMSO)制成細菌PhoQ組氨酸激酶抑制劑，對志賀菌信號轉導系統中PhoQ蛋白具有抑制作用，能抑制革蘭陰性菌生長，并抑制志賀菌的毒力。

本發明中，所述的小分子化合物FDDDC1可用于配制成醫療器械或醫療器具消毒液，還可進一步進行化學結構的改造，制備抗革蘭陰性球菌感染的新藥物。

本發明的細菌PhoQ組氨酸激酶抑制劑，對志賀菌信號轉導系統中PhoQ蛋白具有抑制作用，抑制志賀菌的毒力，可配制成醫療器械或醫療器具消毒液；所述的抑制劑還可用于制備抑制志賀菌毒力的藥物，或可用于制備治療由革蘭陰性菌引起的疾病的藥物。

附圖說明

圖1顯示了本發明中化合物FDDDC1對志賀菌侵襲HeLa細胞的影響，其中，Sf9380為陽性對照，ATCC?25922為陰性對照，DMSO為化合物溶劑對照。