[發明專利]耬斗菜組培培養基及快速繁殖方法

無效

• 申請號: 201110182480.4
• 申請日: 2011-06-30
• 公開（公告）號: CN102246698A
• 公開（公告）日: 2011-11-23
• 發明（設計）人: 趙銀萍;杜喜春;付洪冰;孟長軍;王丹;仲莎
• 申請（專利權）人: 西安文理學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 西安創知專利事務所 61213
• 代理人: 譚文琰

技術領域

本發明屬于植物組織培養技術領域，具體涉及一種耬斗菜組培培養基及快速繁殖方法。

背景技術

耬斗菜花色鮮艷，花形大，花期較長，因其花瓣上端開展，而5個花瓣末端形成的5個距向中心集中，形似漏斗而得名。耬斗菜因其奇特的花形，艷麗的花色而受到人們喜愛，具有較高的觀賞價值。

目前耬斗菜繁殖方法主要為播種繁殖和分株繁殖。播種繁殖對發芽溫度要求嚴格，一般為15℃～20℃，溫度過高則不易發芽，并且播種苗2年后才可以開花。分株繁殖不僅對植株大小有一定要求，而且需要大量人力和時間。現有的兩種繁殖方法不僅繁殖周期較長，要求大量的種子和植株，并且耬斗菜栽培3年后植物易退化，這就需要尋找一種快速高效的耬斗菜繁殖方法，滿足該花卉的大規模工廠化生產需求。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于針對上述現有技術的不足，提供了一種適用于耬斗菜組織培養的培養基以及利用該培養基快速繁殖耬斗菜的方法。采用本發明的組培培養基和方法，增殖培養15天后，芽增殖率達95％以上，增殖頻率不低于2.0，生根培養10天左右，部分幼苗基部產生白色根，培養20天后，大部分幼苗均長出根，生根率達92％以上，移栽成活率達100％，組培苗移栽當年即能開花。

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案是：一種耬斗菜組培培養基，其特征在于，各階段培養基添加物含量分別為：

不定芽誘導培養基：每升MS常規基本培養基中添加6-芐氨基嘌呤0.5mg～3.0mg(優選1.0mg～2.0mg，進一步優選1.0mg)、萘乙酸0.1mg～0.5mg(優選0.2mg～0.3mg，進一步優選0.3mg)、2，4-二氯苯氧乙酸0.2mg～0.4mg(優選0.25mg～0.35mg，進一步優選0.3mg)、蔗糖20g～40g(優選25g～35g，進一步優選30g)和瓊脂4g～8g(優選5g～6g，進一步優選6g)；所述不定芽誘導培養基的pH值為5.8～6.0；

增殖培養基：每升MS常規基本培養基中添加6-芐氨基嘌呤0.5mg～3.0mg(優選1.0mg～2.0mg，進一步優選2.0mg)、萘乙酸0.1mg～0.5mg(優選0.2mg～0.3mg，進一步優選0.2mg)、蔗糖20g～40g(優選25g～35g，進一步優選30g)和瓊脂4g～8g(優選5g～6g，進一步優選6g)；所述增殖培養基的pH值為5.8～6.0；

生根培養基：每升MS常規基本培養基中添加活性炭0.1g～1g(優選0.2g～0.8g，進一步優選0.5g)、蔗糖10g～40g(優選20g～30g，進一步優選20g)和瓊脂4g～8g(優選5g～6g，進一步優選6g)；所述生根培養基的pH值為5.8～6.0。

本發明還提供了一種耬斗菜的快速繁殖方法，其特征在于，該方法包括以下具體步驟：

(1)將滅菌的耬斗菜幼嫩莖端切割后做為外植體，在無菌條件下將外植體接種于不定芽誘導培養基上，培養20天時誘導出不定芽，繼續培養10天；然后在無菌條件下將不定芽切割后接種于增殖培養基上培養30天；再在無菌條件下將增殖培養后的不定芽轉接于生根培養基上培養20天，獲得耬斗菜組培苗；以上培養條件均為：溫度25±2℃，12h光照與12h黑暗交替培養，光照強度為35μmol·m^-2s^-1～40μmol·m^-2s^-1；

(2)待步驟(1)中所述組培苗長至2cm～3cm高，開瓶練苗3天～5天，再移栽到素沙與草炭的質量比為2∶1的栽培介質中，得到耬斗菜再生植株。

本發明與現有技術相比具有以下優點：

1、本發明的組培培養基針對性強、適用性好，外植體經不定芽誘導培養基培養20天時即誘導出不定芽，30天后可見分化出的芽增大長高，芽的誘導率達到70％以上，增殖培養15天后，芽增殖率達95％以上，增殖頻率不低于2.0，生根培養10天左右，部分幼苗基部產生白色根，培養20天后，大部分幼苗均長出根，生根率達92％以上，移栽成活率達100％，組培苗移栽當年即能開花。

2、本發明的方法不受季節限制，可常年生產耬斗菜組培苗，并可實現耬斗菜組培苗的規模化生產。

下面通過實施例，對本發明的技術方案做進一步的詳細描述。

具體實施方式

實施例1

本實施例中各階段培養基添加物含量分別為：