[發(fā)明專(zhuān)利]一種提高動(dòng)物繁育力的新型shRNA及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110176875.3
• 申請(qǐng)日: 2011-06-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102409065A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-04-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 苗向陽(yáng);張瑞杰
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/867
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/867;A01K67/027
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種新型載體的構(gòu)建。具體而言，本發(fā)明針對(duì)綿羊干擾素INHA基因的α亞基的核苷酸序列設(shè)計(jì)合成shRNA單鏈寡核苷酸，構(gòu)建了shRNA慢病毒干擾載體，得到了具有良好應(yīng)用前景的新型載體。

背景技術(shù)

抑制素(Inhibin，INH)是一種能夠通過(guò)垂體負(fù)反饋調(diào)節(jié)卵泡刺激素(Follicle-stimulating?hormone，F(xiàn)SH)分泌的肽類(lèi)性腺激素。它屬于轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)超家族的成員，主要由雌性動(dòng)物的卵巢顆粒細(xì)胞和雄性動(dòng)物的睪丸支持細(xì)胞及睪丸間質(zhì)細(xì)胞[Hayes?FJ，Hall?JE，Boepple?PA，Crowley?WF，Jr.Clinical?review?96：Differential?control?of?gonadotropin?secretion?in?the?human：endocrine?role?of?inhibin.J?Clin?Endocrinol?Metab，1998，83(6)：1835-41.]分泌并廣泛分布于動(dòng)物體的多個(gè)器官中。根據(jù)抑制素的分子組成可將其分為抑制素A、抑制素B等多種類(lèi)型。抑制素最早是由McCullough[McCullagh?DR.Dual?Endocrine?Activity?of?the?Testes.Science，1932，76(1957)：19-20.]在牛睪丸水溶液提取物中發(fā)現(xiàn)的，因其具有強(qiáng)烈抑制卵泡刺激素(FSH)、輕微抑制促黃體素(LH)的作用而得名。

抑制素是一種異二聚體糖蛋白(姜慶林等，2005)，它由一個(gè)α亞基(～20kDa)和四種β亞基(～14kDa)——βA、βB、βC和βE之一所構(gòu)成，α亞基與β亞基之間以二硫鍵相連形成抑制素A(α，βA)、抑制素B(α，βB)等多種抑制素亞型，只有當(dāng)α亞基與β亞基相結(jié)合時(shí)抑制素才具有生物活性。此外，抑制素的β亞基還存在于另一種與抑制素具有截然相反生物學(xué)作用的二聚體分子——激活素(Activins，ACN)中。這一事實(shí)表明α亞基對(duì)于抑制素具有特異性。抑制素α亞基上有糖基化位點(diǎn)，是抑制素的生物活性中心，也是抑制素發(fā)揮生物活性所必需的位點(diǎn)。

使用放射免疫分析法對(duì)靈長(zhǎng)動(dòng)物的卵巢進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)在晚期卵泡期陽(yáng)性抑制素適度增加，并在月經(jīng)周期與LH潮一起達(dá)到峰值[McLachlan?RI，Robertson?DM，Healy?DL，Burger?HG，de?Kretser?DM.Circulating?immunoreactive?inhibin?levels?during?the?normal?human?menstrual?cycle.J?Clin?Endocrinol?Metab，1987，65(5)：954-61.]。在黃體期觀察到的抑制素最高水平與靈長(zhǎng)類(lèi)月經(jīng)周期中較高的孕酮水平呈正相關(guān)。抑制素對(duì)卵泡形成發(fā)揮刺激效應(yīng)，并可能調(diào)控卵泡生長(zhǎng)、發(fā)育、閉鎖、卵母細(xì)胞成熟及精子產(chǎn)生[Woodruff?TK，Lyon?RJ，Hansen?SE，Rice?GC，Mather?JP.Inhibin?and?activin?locally?regulate?rat?ovarian?folliculogenesis.Endocrinology，1990，127(6)：3196-205.]。在生理狀況下抑制素能選擇性地抑制垂體合成和分泌促卵泡素，從而影響卵巢上卵泡的發(fā)育和成熟，是調(diào)節(jié)家畜繁殖力的重要生殖激素之一。