[發明專利]脫細胞干燥活性羊膜的制備方法

無效

• 申請號: 201110171098.3
• 申請日: 2011-06-23
• 公開（公告）號: CN102225217A
• 公開（公告）日: 2011-10-26
• 發明（設計）人: 晏飛燕
• 申請（專利權）人: 天津世紀康泰生物醫學工程有限公司
• 主分類號: A61L27/36
• 分類號: A61L27/36
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所 12201
• 代理人: 陸藝

1.一種脫細胞干燥活性羊膜的制備方法，其特征是由如下步驟組成：

(1)原料處理：取通過病原體檢測后正常的足月剖腹產術后的人胎盤，用無菌生理鹽水清洗，除去血液成分，將羊膜從胎盤絨毛膜上完整鈍性分離，用細胞刮匙刮除羊膜基質面附著的基質成分；

(2)反復凍融：將步驟(1)處理后的羊膜于-60℃～-80℃冷凍2～6h，于37℃水浴融化10～40min，如此反復1～5次；

(3)清洗：將步驟(2)處理后的羊膜浸入PBS液中，于4℃搖床清洗18～30h，取出浸入去污劑中，于20～40℃，在搖床20～200轉/分的速度下振蕩18～30h；取出，再浸入PBS液中，于2～10℃，在搖床20～200轉/分的速度下振蕩40～56h；每8h換一次PBS液；

所述100ml去污劑溶液是用0.15ml～0.35ml的triton?X-100，0.15g～0.35g的脫氧膽酸鈉溶液，余量為PBS配制而成；

(4)冷凍干燥：將經步驟(3)清洗后的羊膜貼附于無菌的醋酸纖維素膜或聚偏氟乙烯膜上，切成統一尺寸的羊膜片，將羊膜片置于冷凍干燥機中，-40～-60℃冷凍干燥2～48h，除去水分，即獲得脫細胞干燥活性羊膜；真空包裝并封口；

(5)伽馬射線消毒滅菌。

2.根據權利要求1所述的一種脫細胞干燥活性羊膜的制備方法，其特征是所述步驟(2)反復凍融為：將步驟(1)處理后的羊膜于-70℃冷凍4h，于37℃水浴融化20min，如此反復3次。

3.根據權利要求1所述的一種脫細胞干燥活性羊膜的制備方法，其特征是所述步驟(3)清洗為：將步驟(2)處理后的羊膜浸入PBS液中，于4℃搖床清洗24h，取出浸入去污劑中，于30℃，在搖床100轉/分的速度下振蕩24h；取出，再浸入PBS液中，于8℃，在搖床100轉/分的速度下振蕩48h；每8h換一次PBS液；

所述100ml去污劑溶液是用0.25ml的triton?X-100，0.25g的脫氧膽酸鈉溶液，余量為PBS配制而成。