[發明專利]一種具有海藻多糖分解酶功能的蛋白及其編碼基因和應用

有效

• 申請號: 201110165760.4
• 申請日: 2011-06-20
• 公開（公告）號: CN102277340A
• 公開（公告）日: 2011-12-14
• 發明（設計）人: 丁宏標;岳明;喬宇;付海燕;陶正國;陳小兵;吳秀麗
• 申請（專利權）人: 廣州立達爾生物科技股份有限公司;中國農業科學院飼料研究所
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;C12N15/56;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N15/11;C12P19/14;C12R1/84
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種蛋白質，是如下(a)或(b)或(c)：

(a)由序列表中序列1自N末端第28至367位氨基酸殘基組成的蛋白質；

(b)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質；

(c)將(a)或(b)的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有海藻多糖分解酶活性的由序列1衍生的蛋白質。

2.編碼權利要求1所述蛋白的基因。

3.如權利要求2所述的基因，其特征在于：所述基因是如下1)至4)中任一所述的DNA分子：

1)序列表的序列2自5’末端第89-1108位核苷酸所示的DNA分子；

2)序列表中序列2所示的DNA分子；

3)在嚴格條件下與1)或2)限定的DNA序列雜交且編碼具有海藻多糖分解酶活性的蛋白的DNA分子；

4)與1)或2)限定的DNA序列具有90％以上同源性且編碼具有海藻多糖分解酶活性的蛋白的DNA分子。

4.含有權利要求2或3所述基因的重組表達載體、表達盒、轉基因細胞系或重組菌。

5.如權利要求4所述的重組表達載體，其特征在于：所述重組表達載體為如下(I)或(II)：

(I)將權利要求2或3所述基因插入pPIC9K-6HIS3’載體的多克隆位點得到的重組質粒；所述pPIC9K-6HIS3’載體是將特異DNA片段插入pPIC9K載體的SnaB?I和Not?I酶切位點之間得到的重組質粒；所述特異DNA片段是將序列表的序列3所示的單鏈DNA和序列表的序列4所示的單鏈DNA退火后得到的雙鏈DNA；

(II)將權利要求2或3所述基因插入pPIC9K載體的多克隆位點得到的重組質粒。

6.如權利要求4所述的重組菌，其特征在于：所述重組菌為將權利要求5所述重組表達載體導入巴斯德畢赤酵母得到的重組酵母菌；所述巴斯德畢赤酵母優選為GS115菌株。

7.擴增權利要求2或3所述基因的全長或其任一片段的引物對。

8.一種制備權利要求1所述蛋白的方法，是培養權利要求6所述的重組菌，得到權利要求1所述蛋白。

9.一種降解海藻多糖和/或海藻酸鈉的方法，是在權利要求1所述蛋白或權利要求6所述重組菌的發酵液上清的作用下，降解海藻多糖和/或海藻酸鈉。

10.一種促進抗生素對銅綠假單胞菌抑制作用的產品，它的活性成分為權利要求1所述蛋白或權利要求6所述重組菌的發酵液上清。