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[發明專利]建鯉類胰島素生長因子1啟動子SNPs的PCR-RFLP檢測方法有效

專利信息
申請號: 201110163127.1 申請日: 2011-06-17
公開(公告)號: CN102311996A 公開(公告)日: 2012-01-11
發明(設計)人: 唐永凱;俞菊華;徐跑;李建林;李紅霞;董在杰 申請(專利權)人: 中國水產科學研究院淡水漁業研究中心
主分類號: C12Q1/68 分類號: C12Q1/68
代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200 代理人: 李紀昌
地址: 214081*** 國省代碼: 江蘇;32
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 建鯉類 胰島素 生長因子 啟動子 snps pcr rflp 檢測 方法
【權利要求書】:

1.建鯉類胰島素生長因子1啟動子SNPs的PCR-RFLP檢測方法,其特征在于該檢測方法包括利用位于Seq?NO.1??第731bp的單核苷酸多態性,PCR擴增出含有多態性位點的基因片段進行檢測,其中引物為Seq?NO.3和Seq?NO.4。

2.根據權利要求1所述的建鯉類胰島素生長因子1啟動子SNPs的PCR-RFLP檢測方法,其特征在于,PCR反應條件為:

含有50ng基因組DNA、15mmol/L?Tris-HCl、pH8.0?50mmol/L?KCl、2mmol/L?MgCl2、200umol/L?在dNTPs、10μmol/L引物和0.5U?Taq?DNA聚合酶的25μl反應體系中進行、反應條件是95℃?3min、30循環、72℃延長8min,4℃度保存,其中30循環的條件為94℃?30s、58℃?30s、72℃?1min;5ul?PCR產物,加入0.2ul×10U/ul的限制性內切酶,37℃酶切3小時,消化產物用2%瓊脂糖凝膠電泳檢測。

3.根據權利要求1所述的建鯉類胰島素生長因子1啟動子SNPs的PCR-RFLP檢測方法,其特征在于,其中所述的多態性是118bp和282bp限制性片段長度多態性。

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