[發明專利]建鯉類胰島素生長因子1啟動子SNPs的PCR-RFLP檢測方法有效
| 申請號: | 201110163127.1 | 申請日: | 2011-06-17 |
| 公開(公告)號: | CN102311996A | 公開(公告)日: | 2012-01-11 |
| 發明(設計)人: | 唐永凱;俞菊華;徐跑;李建林;李紅霞;董在杰 | 申請(專利權)人: | 中國水產科學研究院淡水漁業研究中心 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 南京經緯專利商標代理有限公司 32200 | 代理人: | 李紀昌 |
| 地址: | 214081*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 建鯉類 胰島素 生長因子 啟動子 snps pcr rflp 檢測 方法 | ||
1.建鯉類胰島素生長因子1啟動子SNPs的PCR-RFLP檢測方法,其特征在于該檢測方法包括利用位于Seq?NO.1??第731bp的單核苷酸多態性,PCR擴增出含有多態性位點的基因片段進行檢測,其中引物為Seq?NO.3和Seq?NO.4。
2.根據權利要求1所述的建鯉類胰島素生長因子1啟動子SNPs的PCR-RFLP檢測方法,其特征在于,PCR反應條件為:
含有50ng基因組DNA、15mmol/L?Tris-HCl、pH8.0?50mmol/L?KCl、2mmol/L?MgCl2、200umol/L?在dNTPs、10μmol/L引物和0.5U?Taq?DNA聚合酶的25μl反應體系中進行、反應條件是95℃?3min、30循環、72℃延長8min,4℃度保存,其中30循環的條件為94℃?30s、58℃?30s、72℃?1min;5ul?PCR產物,加入0.2ul×10U/ul的限制性內切酶,37℃酶切3小時,消化產物用2%瓊脂糖凝膠電泳檢測。
3.根據權利要求1所述的建鯉類胰島素生長因子1啟動子SNPs的PCR-RFLP檢測方法,其特征在于,其中所述的多態性是118bp和282bp限制性片段長度多態性。
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