[發明專利]一種四價登革病毒亞單位疫苗及其制備方法和應用

無效

• 申請號: 201110162236.1
• 申請日: 2011-06-16
• 公開（公告）號: CN102824633A
• 公開（公告）日: 2012-12-19
• 發明（設計）人: 秦成峰;趙慧;鄧永強;姜濤;秦鄂德
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院微生物流行病研究所
• 主分類號: A61K39/12
• 分類號: A61K39/12;A61P31/14
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明涉及一種四價登革病毒亞單位疫苗及其制備方法和應用。

背景技術

登革病毒(Dengue?virus)是黃病毒科(Flaviviridae)黃病毒屬的重要成員，其廣泛分布于熱帶和亞熱帶地區，主要傳播媒介為埃及伊蚊。該病毒感染引起的疾病是最重要的蟲媒病毒病之一。據WHO統計，全球每年約有1億人感染登革病毒，隨著全球氣候變暖和國際化交流的增多，該病的流行區域正在不斷擴大，已成為嚴重的公共衛生問題。我國廣東、福建、海南和臺灣等東南沿海地區均為登革熱的高發區。自1978年以來，該地區暴發登革熱流行已達數十次，僅1980年和1985年海南2次流行患者就超過55萬。近兩年廣東和福建省頻繁暴發登革熱，導致上千人患病，嚴重影響了我國經濟事業的正常發展。目前，對登革病毒感染只能進行對癥治療，仍無有效的疫苗用于臨床。

自然界存在的登革病毒有四種血清型(1～4)，即登革1型病毒(DENV1)、登革2型病毒(DENV2)、登革3型病毒(DENV3)、登革4型病毒(DENV4)。每種血清型均可引起患者產生多種癥狀，統稱為登革病毒病，包括：登革熱(dengue?fever，DF)的臨床表現主要以高熱、頭痛、肌肉和關節痛為主，可伴有皮疹、淋巴結腫大和白血球減少。登革出血熱(dengue?hemorrhagic?fever，DHF)的臨床特征為出血、血液濃縮、低血漿蛋白及凝血異常，有休克者為登革休克綜合征(dengue?shock?syndrome，DSS)。

人體被某一血清型的登革病毒感染后，會誘發針對該血清型的長效保護性免疫應答，但針對該型病毒的中和抗體對其它血清型卻無保護作用。相反，抗體與其它血清型病毒形成的抗原-抗體復合物可與單核細胞表面的Fc受體結合，從而獲得感染這些細胞的能力，這種抗體依賴的增強作用(ADE)可使患者產生更為嚴重的DHF/DSS。因此，安全有效的登革疫苗必須同時提供針對四個血清型的保護性免疫應答。泰國Mahidol大學和美國Walter?Reed陸軍研究所采用傳統細胞傳代的方法分別研制的減毒活疫苗雖已進行了多年的臨床試驗，但由于四價疫苗混合物中的一個或多個血清型會增強或抑制疫苗中其它血清型的復制和免疫原性，而且也無法避免ADE的發生。因此，研制同時針對四個血清型病毒的四價登革疫苗極為迫切和重要。

登革病毒基因組為單股正鏈RNA，長約11kb，共編碼3種結構蛋白(C、PrM和E)和7種非結構蛋白(NS1、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B和NS5)。包膜蛋白E有三個結構域：I區、II區和III區。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種預防和/或治療登革病毒病的產品。

本發明所提供的預防和/或治療登革病毒病的產品，其活性成分為由登革病毒DENV1的包膜蛋白E的結構域III所示蛋白、登革病毒DENV2的包膜蛋白E的結構域III所示蛋白、登革病毒DENV3的包膜蛋白E的結構域III所示蛋白和登革病毒DENV4的包膜蛋白E的結構域III所示蛋白組成的組合物。

上述產品中，所述登革病毒DENV1的包膜蛋白E的結構域III所示蛋白、登革病毒DENV2的包膜蛋白E的結構域III所示蛋白、登革病毒DENV3的包膜蛋白E的結構域III所示蛋白和登革病毒DENV4的包膜蛋白E的結構域III所示蛋白的質量比為1∶1∶(1～5)∶1，具體為1∶1∶1∶1。

上述任一所述產品中，所述登革病毒DENV1的包膜蛋白E的結構域III所示蛋白的氨基酸序列為如下1-1或1-2所示：

1-1：SEQ?ID?NO：1所示；

1-2：將SEQ?ID?NO：1所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由1-1衍生的蛋白質；

所述登革病毒DENV2的包膜蛋白E的結構域III所示蛋白的氨基酸序列為如下2-1或2-2所示：

2-1：SEQ?ID?NO：2所示；

2-2：將SEQ?ID?NO：2所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由2-1衍生的蛋白質；

所述登革病毒DENV3的包膜蛋白E的結構域III所示蛋白的氨基酸序列為如下3-1或3-2所示：

3-1：SEQ?ID?NO：3所示；

3-2：將SEQ?ID?NO：3所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由3-1衍生的蛋白質；