[發(fā)明專利]一種菌落PCR方法及試劑盒無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201110159586.2 | 申請日： | 2011-06-14 |
| 公開（公告）號： | CN102230010A | 公開（公告）日： | 2011-11-02 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 王建設(shè);王凡;王安如 | 申請（專利權(quán)）人： | 北京大北農(nóng)科技集團股份有限公司;北京科高大北農(nóng)飼料有限責(zé)任公司 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 北京集佳知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227 | 代理人： | 馮瓊;李玉秋 |
| 地址： | 100080 北京市海淀區(qū)中*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 菌落 pcr 方法 試劑盒 | ||
1.一種菌落PCR方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)取菌落在含溶菌酶或蝸牛酶的緩沖液中37℃水浴處理30～60min；
2)在沸水中煮10min，離心后取上清進行PCR反應(yīng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的菌落PCR方法，其特征在于，所述菌落為乳酸菌、芽孢桿菌或酵母菌的菌落。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的菌落PCR方法，其特征在于，所述溶菌酶濃度為0.4～0.5mg/mL。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的菌落PCR方法，其特征在于，所述蝸牛酶濃度為3～4mg/mL。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的菌落PCR方法，其特征在于，所述PCR反應(yīng)如為陰性結(jié)果，取菌落在含蝸牛酶或溶菌酶的緩沖液中37℃水浴處理30～60min；在沸水中煮10min，離心后取上清再進行PCR反應(yīng)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的菌落PCR方法，其特征在于，步驟2)所述PCR反應(yīng)條件為95℃?10min；94℃?30s，55℃?30s，72℃?1min30s，共30個循環(huán)；72℃延伸10min。
7.一種菌落PCR試劑盒，其特征在于，包括溶菌酶或蝸牛酶。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的試劑盒，其特征在于，還包括細(xì)菌的通用引物27F和1492R、Taq酶、PCR緩沖液和dNTP混合物。
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