[發(fā)明專利]一種菌落PCR方法及試劑盒

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110159586.2
• 申請(qǐng)日: 2011-06-14
• 公開（公告）號(hào): CN102230010A
• 公開（公告）日: 2011-11-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王建設(shè);王凡;王安如
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京大北農(nóng)科技集團(tuán)股份有限公司;北京科高大北農(nóng)飼料有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C12Q1/04
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 馮瓊;李玉秋

1.一種菌落PCR方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)取菌落在含溶菌酶或蝸牛酶的緩沖液中37℃水浴處理30～60min；

2)在沸水中煮10min，離心后取上清進(jìn)行PCR反應(yīng)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的菌落PCR方法，其特征在于，所述菌落為乳酸菌、芽孢桿菌或酵母菌的菌落。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的菌落PCR方法，其特征在于，所述溶菌酶濃度為0.4～0.5mg/mL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的菌落PCR方法，其特征在于，所述蝸牛酶濃度為3～4mg/mL。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的菌落PCR方法，其特征在于，所述PCR反應(yīng)如為陰性結(jié)果，取菌落在含蝸牛酶或溶菌酶的緩沖液中37℃水浴處理30～60min；在沸水中煮10min，離心后取上清再進(jìn)行PCR反應(yīng)。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的菌落PCR方法，其特征在于，步驟2)所述PCR反應(yīng)條件為95℃?10min；94℃?30s，55℃?30s，72℃?1min30s，共30個(gè)循環(huán)；72℃延伸10min。

7.一種菌落PCR試劑盒，其特征在于，包括溶菌酶或蝸牛酶。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的試劑盒，其特征在于，還包括細(xì)菌的通用引物27F和1492R、Taq酶、PCR緩沖液和dNTP混合物。