[發明專利]一種利用高速逆流色譜法制備西紅花苷-Ⅰ的方法

無效

• 申請號: 201110151736.5
• 申請日: 2011-06-07
• 公開（公告）號: CN102276664A
• 公開（公告）日: 2011-12-14
• 發明（設計）人: 蘇劉花
• 申請（專利權）人: 南京澤朗農業發展有限公司
• 主分類號: C07H13/06
• 分類號: C07H13/06;C07H1/08
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域：

本發明屬于天然產物分離領域，尤其是涉及一種利用高速逆流色譜法制備西紅花苷-I的方法。

背景技術：

西紅花苷-I(Crocin?I)，分子式C₄₄H₆₄O₂₄，分子量976.96，是類胡蘿卜素類的藏花酸與二分子龍膽雙糖結合而成的二元酯，分子結構為：

西紅花苷-I為棕紅狀結晶，易溶于熱水，呈橙色，稍溶于無水乙醇、乙醚及其他有機溶劑。在黃色體系的天然色素中，西紅花苷-I比較穩定，具有耐光、耐熱、耐金屬離子和耐化學品等特點，色調變化基本上不受pH的影響，尤其是對于蛋白質、淀粉，還具有優良的染色性，而且安全性高。此外西紅花苷-I還具有抗氧化、抗腫瘤、降糖降脂和護肝等作用。

梔子黃色素是一種從梔子果實中提取，經過純化得到的一種天然水溶性色素，梔子黃色素的主要成分為西紅花苷和藏紅花酸，是一種罕見的水溶性類胡蘿卜素，極易被人體吸收，在人體內可以轉化為維生素A。可以補充人體維生素的不足，是一種營養型著色劑。在國內外食品工業上廣泛應用，是我國批準允許使用的食用天然色素，已列入到我國GB2760-1996《食品添加劑使用衛生標準》中。

西紅花苷-I在西紅花中含量較高，中國藥典2000規定不得少于5％，由于藥材價格較高，一般轉為從茜草科植物梔子果實中提取分離。現有分離高含量西紅花苷-I的方法一般為硅膠柱色譜和制備液相，這些方法操作復雜，制備量較小。如張宏等采用低壓液相色譜法制備西紅花有效成分西紅花苷-I。陳陽等采用采用硅膠柱層析從梔子中分離西紅花酸和西紅花苷純品。

發明內容：

本發明的目的是克服現有技術的缺陷，提供一種利用高速逆流色譜法制備西紅花苷-I的方法。

高速逆流色譜是一種獨特的不用固態載體的液液分配色譜技術，消除了由于樣品在固相載體上的不可逆吸附和降解造成的損失，能實現連續有效分離的實用分離制備技術，能采用多種多樣的溶劑系統對任何極性范圍的樣品進行分離，能實現從微克、微升量級的分析分離到上百毫克、數克量級的制備提純。在天然產物分離純化上的應用特別廣泛。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現的：取乙酸乙酯、乙醇、水混合分層后，取上相充滿高速逆流色譜柱，轉動主機，泵入下相做流動相，將梔子黃色素溶于下相由進樣閥進樣，SP-200紫外檢測器檢測，根據圖譜收集目的成分，減壓干燥流分，即得。

梔子黃色素優選色價400以上的產品。

主機轉動速度可為700-1200rpm，流動相流速控制在1-4ml/min。

所述的乙酸乙酯、甲醇、水混合比為5-7∶3-4∶4-5。

本發明利用高速逆流色譜法從梔子黃色素中分離西紅花苷-I方法，分離速度快、分離量大、樣品無損失，克服了硅膠柱死吸附和制備液相分離量小的缺陷，同時在制備過程中不產生污染物，可以實現西紅花苷-I的連續化生產。

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式：

實施例1：

取乙酸乙酯、乙醇、水，按7∶4∶5比例混和，在分液漏斗中靜置12小時，分取上下相。取上相注滿高速逆流色譜柱，轉動主機，轉速700rpm，泵入下相做流動相，待有流動相流出時，調整流速為4ml/min，同時取流動相溶解色價400的梔子黃色素1g，由進樣閥進樣，SP-200紫外檢測器檢測，根據圖譜收集目的成分，減壓濃縮流分真空干燥，得棕紅色粉末，經質譜、核磁共振、紅外分析為西紅花苷-I、含量為98.7％。

實施例2：

取乙酸乙酯、乙醇、水，按5∶3∶4比例混和，在分液漏斗中靜置8小時，分取上下相。取上相注滿高速逆流色譜柱，轉動主機，轉速1200rpm，泵入下相做流動相，待有流動相流出時，調整流速為2ml/min，同時取流動相溶解色價400的梔子黃色素1g，由進樣閥進樣，SP-200紫外檢測器檢測，根據圖譜收集目的成分，減壓濃縮流分真空干燥，得棕紅色粉末西紅花苷-I，HPLC檢測含量為98.1％。

實施例3：

取乙酸乙酯、乙醇、水，按6∶4∶5比例混和，在分液漏斗中靜置12小時，分取上下相。取上相注滿高速逆流色譜柱，轉動主機，轉速800rpm，泵入下相做流動相，待有流動相流出時，調整流速為1ml/min，同時取流動相溶解色價400的梔子黃色素1g，由進樣閥進樣，SP-200紫外檢測器檢測，根據圖譜收集目的成分，減壓濃縮流分真空干燥，得棕紅色粉末西紅花苷-I、HPLC檢測含量為98.8％。