[發明專利]賴氨酸的三級發酵及其包被制品

有效

• 申請號: 201110151556.7
• 申請日: 2011-06-08
• 公開（公告）號: CN102318739A
• 公開（公告）日: 2012-01-18
• 發明（設計）人: 馬吉銀;陳崇安;孟剛;曹洪;程耀東;劉鑫
• 申請（專利權）人: 寧夏伊品生物科技股份有限公司
• 主分類號: A23K1/16
• 分類號: A23K1/16;C12P13/08;C12R1/15
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.發酵制備L-賴氨酸制品的方法，其包括：

(1)將產L-賴氨酸的工程菌接入第一發酵罐于30-33℃培養8-12小時；

(2)將步驟(1)獲得的培養液以3-7％(體積)的接種量接種于第二發酵罐，于36-40℃培養8-12小時；

(3)將步驟(2)獲得的培養液以10-20％(體積)的接種量接種于第三發酵罐，于36-40℃培養1-5小時；

(4)向第三發酵罐持續流加糖，其中糖的每小時流加量為第三發酵罐內培養液量的0.2-0.35％(重量)，進行10-18小時；

(5)向第三發酵罐持續流加糖和氮源，其中糖的每小時流加量為第三發酵罐內培養液量的0.3-0.5％(重量)，而且氮源的每小時流加量為第三發酵罐內培養液量的0.1-0.25％(重量)，進行30-65小時，優選50-55小時；

(6)將步驟(5)獲得的培養液進行依次進行膜分離并對濾液進行噴霧干燥；

(7)對步驟(6)獲得的顆粒進行篩分，收集粒徑小于0.5mm的顆粒；和

(8)將步驟(7)獲得的顆粒用脂肪包被。

2.權利要求1所述的方法，其中步驟(8)中，步驟(7)獲得的顆粒和脂肪的重量比為3-7∶7-3，優選為4.5-6.5∶5.5-3.5，更優選為5.5-6∶4.5-4。

3.權利要求1所述的方法，其中步驟(8)中，脂肪優選是分餾棕櫚脂肪，更優選是百佳能，最優選是百佳能HTL316。

4.權利要求1所述的方法，其中第一發酵罐和第二發酵罐中的培養基配方為：每18立方米培養基中含，葡萄糖500-750公斤，甘蔗糖蜜50-300公斤，玉米漿400-600公斤，KH₂PO₄?30-80公斤，MgSO₄·7H₂O?3-15公斤，FeSO₄·7H₂O?0.1-1公斤，MnSO₄·7H₂O?0.1-1公斤，生物素5-30克，和葉酸3-10克，優選第一發酵罐和第二發酵罐中的培養基配方為：每18立方米培養基中含，葡萄糖600公斤，甘蔗糖蜜200公斤，玉米漿520公斤，KH₂PO₄?45公斤，MgSO₄·7H₂O?7公斤，FeSO₄·7H₂O?0.5公斤，MnSO₄·7H₂O?0.5公斤，生物素12克，和葉酸5克。

5.權利要求1所述的方法，其中第三發酵罐的培養基配方為：每300立方米培養基中含，蔗糖10000-15000公斤，玉米漿10000-15000公斤，KH₂PO₄?700-1200公斤，MgSO₄·7H₂O?5-220公斤，FeSO₄·7H₂O?5-25公斤，MnSO₄·7H₂O?5-220公斤，生物素150-300克，和葉酸50-120克，優選第三發酵罐的培養基配方為：每300立方米培養基中含，蔗糖12000公斤，玉米漿12000公斤，KH₂PO₄?1000公斤，MgSO₄·7H₂O?100公斤，FeSO₄·7H₂O?12公斤，MnSO₄·7H₂O?120公斤，生物素200克，和葉酸85克。

6.權利要求1所述的方法，其中步驟(4)和(5)中的溫度與步驟(3)中的溫度相同，優選為38-39℃。

7.權利要求1所述的方法，其中步驟(4)和(5)中的糖是蔗糖；和/或，其中步驟(5)中的氮源是無機氮源，優選是硫酸銨或氯化銨。

8.權利要求1所述的方法，其中工程菌是表達二氫吡啶二羧酸合成酶變體的棒狀桿菌，其中所述二氫吡啶二羧酸合成酶變體相對于野生型二氫吡啶二羧酸合成酶的活性提高。