[發明專利]一種雙歧桿菌微膠囊及其制備方法

有效

• 申請號: 201110147416.2
• 申請日: 2011-06-02
• 公開（公告）號: CN102210659A
• 公開（公告）日: 2011-10-12
• 發明（設計）人: 范代娣;朱曉麗;段志廣;馬曉軒;嚴建亞
• 申請（專利權）人: 陜西巨子生物技術有限公司
• 主分類號: A61K9/50
• 分類號: A61K9/50;A61K35/74;A61P1/00;A61P3/06;A61P35/00
• 代理公司: 西安新思維專利商標事務所有限公司 61114
• 代理人: 李罡

技術領域

本發明屬于益生菌制品制備技術領域，具體涉及一種雙歧桿菌微膠囊及其制備方法。

背景技術

雙歧桿菌是人和動物腸道內重要的益生菌，具有調節腸道菌群平衡、提供營養、降低膽固醇和抗癌等特性。然而它專性厭氧，對氧氣、pH、溫度、濕度等外界不良環境極為敏感，在生產、貯存和運輸過程中很難保持活性；而且干菌粉經口服食用時，無法耐受低pH值的胃酸、膽鹽等環境，難以保證有大量的存活菌到達腸道而定殖于腸粘膜上。

發明內容

本發明的目的是提供一種能有效延長雙歧桿菌保藏期的雙歧桿菌微膠囊及其制備方法，解決了液體雙歧桿菌制劑中活菌含量大幅度下降及不耐胃酸的問題。

本發明所采用的技術方案是；

一種雙歧桿菌微膠囊的制備方法，其特征在于：

由以下步驟實現：

步驟一：在37℃的溫度條件下，將活化的雙歧桿菌在液體培養基中厭氧培養24?小時，離心收集菌體，用0.85%的生理鹽水洗滌制備菌懸液；

步驟二：制備保護劑，每1000?mL保護劑添加有1.23?g膠原蛋白、11.50?g糖類物質和4.65?mL甘油，其余為蒸餾水；

步驟三：將經過滅菌處理的保護劑與菌懸液按2:1的體積比混合均勻，靜置30分鐘，在-20℃的溫度條件下預凍2?小時，然后在-50℃、真空度為50-100?毫托的真空冷凍干燥箱中干燥48小時，制備得到凍干菌粉；

步驟四：向質量分數為1-2%的海藻酸鈉溶液中加入0.1?g凍干菌粉，凍干菌粉與海藻酸鈉質量比為1∶（3-5），混合均勻后得到菌膠混合液；

步驟五：將菌膠混合液逐滴加入到含有0.2%的吐溫-80的大豆油中，菌膠混合液與大豆油的體積比為1∶5，乳化并快速加入到摩爾濃度為0.1?mol/L的氯化鈣溶液中，靜置30分鐘；

步驟六：離心收集微膠囊，用質量分數為0.85%的生理鹽水洗滌，將制備好的微膠囊置于真空冷凍干燥箱中干燥。

所述的步驟二中，膠原蛋白為動物源膠原蛋白或類人膠原蛋白；

所述的步驟二中，糖類物質為海藻糖或蔗糖。

所述的步驟五中，乳化的攪拌速度為300-500?rpm/min，乳化時間為5-15分鐘，CaCl₂溶液的加入速度為20?mL/s。

所述的步驟六中，離心收集微膠囊的條件為350?g，10分鐘，4℃；

所述的步驟六中，真空冷凍干燥的條件為-20℃預凍2小時，然后在-50℃、真空度為50-100毫托的真空冷凍干燥箱中干燥12?小時。

所述的一種雙歧桿菌微膠囊的制備方法，其特征在于：

由以下步驟實現：

步驟一：在37℃的溫度條件下，將活化的雙歧桿菌在液體培養基中厭氧培養24?小時，離心收集菌體，用0.85%的生理鹽水洗滌制備菌懸液；

步驟二：制備保護劑，每1000?mL保護劑添加有1.23?g類人膠原蛋白、11.50?g海藻糖、以及4.65?mL甘油，其余為蒸餾水；

步驟三：將經過滅菌處理的保護劑與菌懸液按2:1的體積比混合均勻，靜置30分鐘，在-20℃的溫度條件下預凍2?小時，然后在-50℃、真空度為75毫托的真空冷凍干燥箱中干燥48小時，制備得到凍干菌粉；

步驟四：向質量分數為1.5%的海藻酸鈉溶液中加入0.1?g凍干菌粉，凍干菌粉與海藻酸鈉質量比為1∶4，混合均勻后得到菌膠混合液；

步驟五：將菌膠混合液逐滴加入到含有0.2%的吐溫-80的大豆油中，菌膠混合液與大豆油的體積比為1∶5，乳化并快速加入到摩爾濃度為0.1?mol/L的氯化鈣溶液中，靜置30分鐘；乳化的攪拌速度為400?rpm/min，乳化時間為10分鐘，CaCl₂溶液的加入速度為20?mL/s；

步驟六：離心收集微膠囊，用質量分數為0.85%的生理鹽水洗滌，將制備好的微膠囊置于真空冷凍干燥箱中干燥；離心收集微膠囊的條件為350?g，10分鐘，4℃；真空冷凍干燥的條件為-20℃預凍2小時，然后在-50℃、真空度為75毫托的真空冷凍干燥箱中干燥12?小時。

如所述的一種雙歧桿菌微膠囊。

本發明具有以下優點：

本發明的雙歧桿菌微膠囊具有耐胃酸性、耐膽鹽性和腸溶性的優點，菌體的存活率高，制備方法簡單，實用性強，便于工業化大生產；微膠囊的貯藏穩定性良好，解決了益生菌制劑保藏期短的問題。

附圖說明

圖1為雙歧桿菌微膠囊人工胃液的耐受性測試結果。

圖2為菌粉人工膽鹽的耐受性測試結果。